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dousiwode

新虫 (初入文坛)

[求助] 想做根霉的基因敲除啊,不懂,求助各位

想做根霉的基因敲除,看了一些文献,现在还是不明白。

是不是先克隆目的基因两端的序列,再在之间连入标记基因,转化,就行了~~
还有看了很多文献都要做平末端连接,不知道什么原因?

好像霉菌的基因敲除好少啊~~我才研一,能做出来么。。。。


还有一个想法,酿酒酵母基因敲除的那个Cre-LoxP重组酶系统,能不能用在根霉中呢?啊~~~我怎么设么都不会!!!


求各位大侠,多多帮忙。我的金币真的没几个。。。
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dousiwode

新虫 (初入文坛)

太太感谢大家啦!!
4楼2012-11-19 10:37:28
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查看全部 9 个回答

西瓜

荣誉版主 (知名作家)

帮顶
只要好好做,肯定能做出来滴,这个可以跟你打包票。
你可以搜索“同源重组”来看看,你说的敲除方法用到了同源重组的原理。
2楼2011-06-13 23:55:32
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
dhd997(金币+6, EPI+1): 记录专家考核 2011-06-14 16:10:59
目前的基因敲除方法很多的,插入突变,缺失突变RNAi等等。。。
首先你可以查找一下关于你这个根霉的基因敲除的一些文献。。比如在谷歌学术中输入:Rhizopus+gene+knock-out,可以在结果中筛选一下。。。应该会有你想要的文章的。。。

给你三篇关于基因敲除方面的文献,虽然发的都是中文不怎么样的杂志,可是就当了解一下也是可以的。。。
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
3楼2011-06-14 14:46:30
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sumoeric

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

向楼主 推荐一下,其实就是基因中断,可以通过同源重组的方法来达到,你自己说的就是用同源重组的形式来达到目的。由于本人是做放线菌的,对于真菌不是很了解,但是应该方式都一样,先要构建中断质粒,也就是你要中断的片段两边的一些序列要PCR下来或者酶切下来,作为同源臂。二楼向您推荐的一些文献还是能让楼主了解一些的,如果还是不太了解可以再联系,给你一些文献。
5楼2012-11-19 16:47:40
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