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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 想做根霉的基因敲除啊，不懂，求助各位
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dousiwode

新虫 (初入文坛)

[求助] 想做根霉的基因敲除啊，不懂，求助各位

想做根霉的基因敲除，看了一些文献，现在还是不明白。

是不是先克隆目的基因两端的序列，再在之间连入标记基因，转化，就行了~~
还有看了很多文献都要做平末端连接，不知道什么原因？

好像霉菌的基因敲除好少啊~~我才研一，能做出来么。。。。


还有一个想法，酿酒酵母基因敲除的那个Cre-LoxP重组酶系统，能不能用在根霉中呢？啊~~~我怎么设么都不会！！！


求各位大侠，多多帮忙。我的金币真的没几个。。。
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1楼 2011-06-13 15:08:14
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)
帮顶
只要好好做，肯定能做出来滴，这个可以跟你打包票。
你可以搜索“同源重组”来看看，你说的敲除方法用到了同源重组的原理。
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2楼2011-06-13 23:55:32
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
dhd997(金币+6, EPI+1): 记录专家考核 2011-06-14 16:10:59
目前的基因敲除方法很多的，插入突变，缺失突变RNAi等等。。。
首先你可以查找一下关于你这个根霉的基因敲除的一些文献。。比如在谷歌学术中输入:Rhizopus+gene+knock-out,可以在结果中筛选一下。。。应该会有你想要的文章的。。。

给你三篇关于基因敲除方面的文献，虽然发的都是中文不怎么样的杂志，可是就当了解一下也是可以的。。。
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Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
3楼2011-06-14 14:46:30
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dousiwode

新虫 (初入文坛)
太太感谢大家啦！！
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4楼2012-11-19 10:37:28
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sumoeric

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

向楼主 推荐一下，其实就是基因中断，可以通过同源重组的方法来达到，你自己说的就是用同源重组的形式来达到目的。由于本人是做放线菌的，对于真菌不是很了解，但是应该方式都一样，先要构建中断质粒，也就是你要中断的片段两边的一些序列要PCR下来或者酶切下来，作为同源臂。二楼向您推荐的一些文献还是能让楼主了解一些的，如果还是不太了解可以再联系，给你一些文献。
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5楼2012-11-19 16:47:40
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lt7510578

银虫 (小有名气)
同是研一新生，做基因敲除，帮顶！
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6楼2012-11-29 16:21:19
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刘玉佩

金虫 (小有名气)
这是去年的贴了，不知道楼主做的如何了？
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7楼2013-01-10 17:13:10
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jiaoxiayoulu

新虫 (小有名气)
我是做酵母基因敲除的，也是研一！不懂。
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8楼2013-04-02 20:17:17
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lyyjackey

新虫 (小有名气)
我也是研一做酿酒酵母基因敲除的，希望以上同行，多多交流，以求共同进步。
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9楼2013-05-24 14:13:04
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