版块导航
正在加载中...
客户端APP下载
论文辅导
申博辅导
登录
注册
帖子
帖子
用户
本版
应《网络安全法》要求,自2017年10月1日起,未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用,请尽快对帐号进行手机号验证,感谢您的理解与支持!
24小时热门版块排行榜
>
论坛更新日志
(3277)
>
文献求助
(276)
>
导师招生
(161)
>
虫友互识
(126)
>
休闲灌水
(107)
>
论文道贺祈福
(92)
>
招聘信息布告栏
(64)
>
考博
(60)
>
论文投稿
(51)
>
基金申请
(39)
>
硕博家园
(36)
>
博后之家
(29)
>
绿色求助(高悬赏)
(22)
>
外文书籍求助
(18)
>
教师之家
(16)
>
公派出国
(16)
小木虫论坛-学术科研互动平台
»
生物医药区
»
生物科学
»
最近在做PCR,同样的体系,同样的模板,引物1能扩出来。引物2、3做不出来,去原因
7
1/1
返回列表
查看: 1462 | 回复: 6
只看楼主
@他人
存档
新回复提醒
(忽略)
收藏
在APP中查看
qianworkhard
新虫
(初入文坛)
应助: 0
(幼儿园)
金币: 1169
散金: 9
帖子: 17
在线: 16.8小时
虫号: 1166031
注册: 2010-12-09
专业: 生物化学
[
求助
]
最近在做PCR,同样的体系,同样的模板,引物1能扩出来。引物2、3做不出来,去原因
最近在做PCR,同样的体系,同样的模板,引物1能扩出来,大概400多bp,在这400bp区间有设计了引物2和3,但这两段引物就什么都扩不出来?梯度也做了依旧没结果,可以肯定是引物的原因吗?
回复此楼
» 猜你喜欢
北京211副教授,35岁,想重新出发,去国外做博后,怎么样?
已经有3人回复
自荐读博
已经有3人回复
求助:我三月中下旬出站,青基依托单位怎么办?
已经有5人回复
论文终于录用啦!满足毕业条件了
已经有22人回复
不自信的我
已经有5人回复
磺酰氟产物,毕不了业了!
已经有4人回复
投稿Elsevier的杂志(返修),总是在选择OA和subscription界面被踢皮球
已经有8人回复
» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:
细菌引物 338F 518R 做DGGE之后 pcr
已经有9人回复
两种引物的PCR电泳图,做了多次还是不解
已经有18人回复
有谁做过amoA引物 硝化细菌 pcr
已经有5人回复
1.5kb的 PCR目的序列GC含量高达67%,引物Tm值达90℃,怎么P比较好?
已经有16人回复
【求助/交流】两条序列只有1-2个变异位点,能设计特异引物区别出来吗?
已经有23人回复
【求助/交流】分子克隆后M13引物PCR扩增
已经有32人回复
【求助/交流】PCR引物二聚体问题
已经有11人回复
【求助/交流】pcr反应目的条带很浅,引物二聚体很亮
已经有33人回复
【求助/交流】PCR引物
已经有3人回复
【求助/交流】做过大引物全质粒PCR的进来看
已经有29人回复
【问题反馈】一对引物扩出来的产物测序后竟然是很多质粒的PCR产物,再怎么区分呢?
已经有10人回复
【分享】PCR产物中减少引物二聚体的方法
已经有33人回复
【求助/交流】PCR只有引物二聚体,有图
已经有20人回复
【求助/交流】PCR引物设计出来了,但酶切之后电泳没条带啊
已经有18人回复
1楼
2011-05-31 16:53:43
已阅
回复此楼
关注TA
给TA发消息
送TA红花
TA的回帖
qianworkhard
新虫
(初入文坛)
应助: 0
(幼儿园)
金币: 1169
散金: 9
帖子: 17
在线: 16.8小时
虫号: 1166031
注册: 2010-12-09
专业: 生物化学
图一为引物2,图二为引物1,图三为引物3,图四为引物2、3电泳图!
赞
一下
回复此楼
高级回复
2楼
2011-05-31 16:56:16
已阅
回复此楼
关注TA
给TA发消息
送TA红花
TA的回帖
天使托
专家顾问
(职业作家)
T.Shen
专家经验: +57
BioEPI: 17
应助: 95
(初中生)
贵宾: 0.263
金币: 16382.3
散金: 593
红花: 74
沙发: 9
帖子: 3648
在线: 288.2小时
虫号: 441757
注册: 2007-10-27
专业: 微生物生理与生物化学
管辖:
微生物
想问一下楼主做的是神马东东?
一般PCR不都是两条引物么?
赞
一下
回复此楼
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
3楼
2011-05-31 22:24:38
已阅
回复此楼
关注TA
给TA发消息
送TA红花
TA的回帖
qianworkhard
新虫
(初入文坛)
应助: 0
(幼儿园)
金币: 1169
散金: 9
帖子: 17
在线: 16.8小时
虫号: 1166031
注册: 2010-12-09
专业: 生物化学
嗯,一队引物就可以了,我想要不同长短的片段。
赞
一下
回复此楼
4楼
2011-06-01 08:18:12
已阅
回复此楼
关注TA
给TA发消息
送TA红花
TA的回帖
terry130
木虫
(正式写手)
BioEPI: 4
应助: 0
(幼儿园)
贵宾: 0.001
金币: 2283.9
散金: 19
红花: 9
帖子: 388
在线: 39.3小时
虫号: 313316
注册: 2007-02-24
性别: GG
专业: 细胞死亡
【答案】应助回帖
qianworkhard(金币+5): 2011-06-01 14:00:00
你的图四里那两个lane不是有片段吗??
不管怎样,用primer5 设计的引物有时也会不好用,你primer1都出来了估计不是PCR体系里药品的问题,条件方面如果你摸梯度都不成功的话建议你试一下 2 step PCR, 有时这个的成功率比较高,看你这两条primer的TA值的话你2 step PCR 的 退火+延伸的温度可以设定在65-68度之间。
赞
一下
回复此楼
摒气动方息,宁神心自明。
5楼
2011-06-01 08:54:09
已阅
回复此楼
关注TA
给TA发消息
送TA红花
TA的回帖
qianworkhard
新虫
(初入文坛)
应助: 0
(幼儿园)
金币: 1169
散金: 9
帖子: 17
在线: 16.8小时
虫号: 1166031
注册: 2010-12-09
专业: 生物化学
图四中的最下端marker为100bp,那条带应该是引物,不是目的片段!还是很感谢哦!
赞
一下
回复此楼
6楼
2011-06-01 09:13:38
已阅
回复此楼
关注TA
给TA发消息
送TA红花
TA的回帖
terry130
木虫
(正式写手)
BioEPI: 4
应助: 0
(幼儿园)
贵宾: 0.001
金币: 2283.9
散金: 19
红花: 9
帖子: 388
在线: 39.3小时
虫号: 313316
注册: 2007-02-24
性别: GG
专业: 细胞死亡
引用回帖:
Originally posted by
qianworkhard
at 2011-06-01 09:13:38:
图四中的最下端marker为100bp,那条带应该是引物,不是目的片段!还是很感谢哦!
那么亮的引物带不正常啊,看着像是二聚体,你再确认一下你的引物序列吧
赞
一下
回复此楼
摒气动方息,宁神心自明。
7楼
2011-06-02 08:17:10
已阅
回复此楼
关注TA
给TA发消息
送TA红花
TA的回帖
相关版块跳转
新药研发
药学
药品生产
分子生物
微生物
动植物
生物科学
医学
我要订阅楼主
qianworkhard
的主题更新
7
1/1
返回列表
如果回帖内容含有宣传信息,请如实选中。否则帐号将被全论坛禁言
普通表情
龙
兔
虎
猫
百度网盘
|
360云盘
|
千易网盘
|
华为网盘
在新窗口页面中打开自己喜欢的网盘网站,将文件上传后,然后将下载链接复制到帖子内容中就可以了。
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭
确定