应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 蛋白表达 难
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
181/2返回列表12下一页
查看: 1084  |  回复: 17
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看

yanfeier

金虫 (小有名气)

[求助] 蛋白表达 难

最近在忙一段基因的表达，但是连到PET-32a上面，就是不表达，不知道具体的原因出在什么地方？37度  IPTG终浓度1mM   过夜诱导，请各位帮帮找找原因
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

【分子生物】EPI帖

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-05-29 10:26:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gagalady

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

yanfeier(金币+1): 2011-05-30 09:13:31
想知道你想表达的这段基因的来处 什么基因呀
也许换换表达菌
赞一下 回复此楼
2楼2011-05-29 10:48:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
dhd997(金币+4): 是啊 2011-05-29 12:26:25
yanfeier(金币+2): 2011-05-30 09:13:38
1：诱导温度有没有试试？
2：诱导剂浓度呢？
3：如果前两者做过了，那么你的引物设计是否有问题？
4：实在不行，换载体吧、
赞一下(1人) 回复此楼
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
3楼2011-05-29 11:51:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sfb1020

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
1949stone(金币+2): 可以试试 2011-05-29 13:48:17
yanfeier(金币+1): 2011-05-30 09:13:46
你要表达的蛋白可能对表达菌有毒性，可以换个表达菌试试
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-05-29 13:29:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lly198784

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
yanfeier(金币+2): 2011-05-30 09:19:51
dhd997(金币+2): 有道理 2011-05-30 12:46:34
表达载体针对你的宿主菌是表达的吗？有文献报道吗？诱导剂加入的时间及诱导剂浓度以及诱导时间很重要的哦！
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2011-05-29 15:48:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangbin1

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-05-30 08:29:21
我也遇到过这种情况，把所有条件都试过了，就是不表达。引物什么的都没有问题。最后是换载体解决的。换完GST标签的质粒，表达量就很好了。建议你换个GST标签的载体，可能结果会有所改变。不要再换PET系列的了。
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2011-05-29 23:40:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

IMB2009

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-05-30 08:29:33
诱导后低温 大概20度试试
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2011-05-30 00:18:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yguang

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-05-30 08:29:44
连接前后酶切验证了吗？关键是测序验证了吗？如果发生了移码或突变就麻烦了！
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2011-05-30 00:30:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yanfeier

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 天使托 at 2011-05-29 11:51:30:
1：诱导温度有没有试试？
2：诱导剂浓度呢？
3：如果前两者做过了，那么你的引物设计是否有问题？
4：实在不行，换载体吧、

是不是在37度诱导肯定可以表达呀 ？
你所说的引物设计的问题指的是什么？
赞一下 回复此楼
9楼2011-05-30 09:11:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yanfeier

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by yguang at 2011-05-30 00:30:23:
连接前后酶切验证了吗？关键是测序验证了吗？如果发生了移码或突变就麻烦了！

你说的这些都没有错误
赞一下 回复此楼
10楼2011-05-30 09:12:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yanfeier 的主题更新
181/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料求调剂 +5 .m.. 2026-03-25 5/250 2026-03-27 11:08 by 不吃魚的貓
[考研] 311求调剂 +5 勇敢的小吴 2026-03-20 5/250 2026-03-27 11:07 by 不吃魚的貓
[考研] 考研292求调剂 +3 YIXIAO789 2026-03-26 3/150 2026-03-27 10:51 by guoweigw
[考研] 0703化学一志愿南京师范大学303求调剂 +3 zzffylgg 2026-03-24 3/150 2026-03-27 10:42 by shangxh
[考研] 324求调剂 +5 hanamiko 2026-03-26 5/250 2026-03-27 10:33 by wangjy2002
[考研] 求调剂，一志愿 南京航空航天大学大学 ，080500材料科学与工程学硕 +4 @taotao 2026-03-26 5/250 2026-03-27 08:10 by hypershenger
[考研] 281求调剂 +3 亚克西good 2026-03-26 5/250 2026-03-26 19:48 by 不吃魚的貓
[考研] 化学工程085602 305分求调剂 +17 RichLi_ 2026-03-25 17/850 2026-03-26 19:44 by plmuchong
[考研] 085601求调剂总分293英一数二 +4 钢铁大炮 2026-03-24 4/200 2026-03-26 16:28 by dick_runner
[考研] 一志愿天津大学339材料与化工求调剂 +3 江往卖鱼 2026-03-26 3/150 2026-03-26 09:42 by 王小欠i
[考研] 299求调剂 +4 15188958825 2026-03-25 4/200 2026-03-25 22:56 by 418490947
[基金申请] 请教下大家 2026年国家基金申请是双盲审吗？ +3 lishucheng1 2026-03-22 5/250 2026-03-24 08:22 by gltch
[考研] 336化工调剂 +4 王大坦1 2026-03-23 5/250 2026-03-23 18:32 by allen-yin
[考研] 工科0856求调剂 +5 沐析汀汀 2026-03-21 5/250 2026-03-23 17:56 by 海瑟薇-
[考研] 求老师收我 +3 zzh16938784 2026-03-23 3/150 2026-03-23 12:56 by ztnimte
[考研] 石河子大学（211、双一流）硕博研究生长期招生公告 +3 李子目 2026-03-22 3/150 2026-03-22 21:01 by 怎么释怀
[考研] 一志愿华中科技大学071000，求调剂 +4 沿岸有贝壳6 2026-03-21 4/200 2026-03-22 07:21 by ilovexiaobin
[考研] 0703化学297求调剂 +3 Daisy☆ 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:45 by ColorlessPI
[考研] 材料与化工（0856）304求 B区 调剂 +3 邱gl 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:47 by lature00
[考研] 330求调剂0854 +3 assdll 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:01 by 搏击518
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭