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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » Sau3A I 不完全酶切
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芥末蚕豆

铜虫 (初入文坛)

[求助] Sau3A I 不完全酶切

Sau3A I 不完全酶切如何酶切出比较大的片段？片段用普通的电泳能跑出来吗？我看好多都是用蔗糖梯度离心后电泳的！
我每次都是2倍梯度稀释！但是不管怎么稀释每次都全碎了！
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开心就好！
1楼 2011-05-20 21:12:44
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zmw_520

禁虫 (小有名气)
芥末蚕豆(金币+1): 2011-05-22 11:14:37
本帖内容被屏蔽
3楼2011-05-21 10:30:54
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yabxxh

木虫 (正式写手)
...，怎么还没有高手出现吗
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2楼2011-05-21 09:32:49
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芥末蚕豆

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by zmw_520 at 2011-05-21 10:30:54:
你不完全酶切之后是做什么？我是要做基因组文库，也是不完全酶切，我就开始小量的摸条件，酶切过夜，条件摸好之后就可以大量的切，然后跑普通电泳，回收2K到10K的片段，从你的图上看貌似切碎了，其实可能酶切还不 ...

我是想要比较大一点的条带，大概15k吧！我现在就是小量的摸条件，但是总是这样！切不出比较大的！要么就是切不开，要么就是全碎！
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开心就好！
4楼2011-05-21 19:19:15
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茉莉维尼

新虫 (初入文坛)
小丹木木(金币+5): 新虫回帖，呱唧呱唧!情人节快乐! 2012-02-14 10:49:06
把酶的浓度再降低点啊，我想从10倍开始稀释都行，如果还不行，建议你可以试试BamHI，这个酶要弱点。
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5楼2012-02-14 10:33:33
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