| 查看: 2232 | 回复: 11 | |||
| 本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看 | |||
[求助]
求助，PCR的电泳结果出了未知问题
|
|||
这是我电泳的条带，应该在700BP和550BP出目的带，结果在最下面有很严重的拖尾，目的条带看不出来，请问各位大侠是什么原因？ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 【分子生物】EPI帖 |
» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有195人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 【求助/交流】PCR产物电泳条带弥散？？？
已经有30人回复
- 【求助/交流】PCR电泳结果疑问
已经有13人回复
- 【求助/交流】帮忙看下定量PCR 溶解曲线和电泳问题
已经有4人回复
- 【求助/交流】PCR产物电泳检测
已经有20人回复
- 【求助/交流】pcr结果电泳条带很淡
已经有14人回复
- 【求助/交流】PCR产物电泳问题
已经有8人回复
- 【求助/交流】PCR后电泳无结果
已经有7人回复
- 【求助/交流】大家帮忙看下我的PCR电泳图，急！做了7.8次还是这样。
已经有15人回复
- 【求助/交流】PCR电泳问题
已经有6人回复
- 【求助/交流】为什么PCR产物第一次跑电泳有结果，第二次就什么也没有了
已经有12人回复
- 【求助/交流】（5.20更新）PCR产物电泳没有条带，why?
已经有20人回复
beautybanana
木虫 (著名写手)
- MolEPI: 22
- 应助: 23 (小学生)
- 贵宾: 0.02
- 金币: 2973.8
- 散金: 5088
- 红花: 26
- 帖子: 1694
- 在线: 485.8小时
- 虫号: 1142157
- 注册: 2010-11-09
- 性别: GG
- 专业: 纳米生物学
2楼2011-05-19 11:01:25
天使托
专家顾问 (职业作家)
T.Shen
-
专家经验: +57 - MolEPI: 106
- 应助: 95 (初中生)
- 贵宾: 0.263
- 金币: 16332.8
- 散金: 593
- 红花: 74
- 沙发: 9
- 帖子: 3652
- 在线: 289小时
- 虫号: 441757
- 注册: 2007-10-27
- 专业: 微生物生理与生物化学
- 管辖: 微生物
3楼2011-05-19 11:55:58
4楼2011-05-19 12:23:10
5楼2011-05-19 12:55:43
ycyycy
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 755.4
- 帖子: 267
- 在线: 55.6小时
- 虫号: 532299
- 注册: 2008-03-24
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
6楼2011-05-19 14:05:54
7楼2011-05-19 14:17:30
★ ★
西瓜(金币+2): 反馈很积极，要鼓励的，呵呵~下次把问题的补充放在1楼吧，点击下方的“编辑”就可以了。 2011-05-19 16:25:33
西瓜(金币+2): 反馈很积极，要鼓励的，呵呵~下次把问题的补充放在1楼吧，点击下方的“编辑”就可以了。 2011-05-19 16:25:33
谢谢大家的热心，心里很温暖 这个本身就是退火温度的PCR，从左到右分别是55，57，61，63和65度。 反映体系是：ddH2O 17.5μL 10×Taq reaction buffer 2.5μL dNTP（2.5mM） 1μL P1（10μM） 1μL P2（10μM） 1μL 基因组DNA 1μL Taq DNA polymerase（2.5U/μL） 1μL Total Vol. 25μL 55的在1000Bp左右有个微弱的带。。。 大家看这个体系有问题吗？ |
8楼2011-05-19 14:18:13
lly198784
木虫 (正式写手)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 2357.5
- 散金: 30
- 帖子: 411
- 在线: 151.2小时
- 虫号: 716835
- 注册: 2009-03-07
- 性别: MM
- 专业: 生物化工与食品化工
9楼2011-05-19 14:19:06
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★
西瓜(金币+4): 欢迎新虫交流！ 2011-05-23 00:55:12
yanyuyu(金币+2): 谢谢你，我这个图本身就是梯度的PCR，有做了几次好了些，准备加大循环次数 2011-05-23 14:01:34
西瓜(金币+4): 欢迎新虫交流！ 2011-05-23 00:55:12
yanyuyu(金币+2): 谢谢你，我这个图本身就是梯度的PCR，有做了几次好了些，准备加大循环次数 2011-05-23 14:01:34
| 个人感觉：模板有些问题，楼主说是基因组DNA模板多大量（不是体积），前端不太像引物二聚体！估计PCR体系应该不会有问题吧。。体系出问题也就是特异性可能会有所差异。。总应该有带才是！按照你退火温度55时有1000bp的带而温度升高后同样位置没有条带估计是引物没有结合上。。引物的特异性也有些问题。。或者模板量太低。。建议做个NESTING PCR。。如果讨厌设计两套引物的话，最快的方法用你55度的PCR产物当模板。。再用你的引物P一次或者干脆加大循环数。。。看能不能出来。。目的带。。如果出来了再优化优化条件。。 |
10楼2011-05-21 15:26:40
