应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助，PCR的电泳结果出了未知问题
51/1返回列表
查看: 2698  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

yanyuyu

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助，PCR的电泳结果出了未知问题

这是我电泳的条带，应该在700BP和550BP出目的带，结果在最下面有很严重的拖尾，目的条带看不出来，请问各位大侠是什么原因？
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

【分子生物】EPI帖

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-05-19 10:05:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

deblway

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
西瓜(金币+4): 欢迎新虫交流！ 2011-05-23 00:55:12
yanyuyu(金币+2): 谢谢你，我这个图本身就是梯度的PCR，有做了几次好了些，准备加大循环次数 2011-05-23 14:01:34
个人感觉：模板有些问题，楼主说是基因组DNA模板多大量（不是体积），前端不太像引物二聚体！估计PCR体系应该不会有问题吧。。体系出问题也就是特异性可能会有所差异。。总应该有带才是！按照你退火温度55时有1000bp的带而温度升高后同样位置没有条带估计是引物没有结合上。。引物的特异性也有些问题。。或者模板量太低。。建议做个NESTING PCR。。如果讨厌设计两套引物的话，最快的方法用你55度的PCR产物当模板。。再用你的引物P一次或者干脆加大循环数。。。看能不能出来。。目的带。。如果出来了再优化优化条件。。
赞一下(1人) 回复此楼
海贼王！哥当定了。。。。
10楼2011-05-21 15:26:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

beautybanana

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
1949stone(金币+2): 鼓励 2011-05-19 12:33:00
1949stone(金币+2): 越看越有道理 2011-05-19 12:34:16
引用回帖:
Originally posted by yanyuyu at 2011-05-19 10:05:42:
这是我电泳的条带，应该在700BP和550BP出目的带，结果在最下面有很严重的拖尾，目的条带看不出来，请问各位大侠是什么原因？

在750bp和500bp（DL2000的marker是吧）处没有目的条带，没有扩增出产物，可能是引物或是PCR程序问题，再仔细核对下~做个温度梯度，不行的话就检查下引物的特异性了~
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2011-05-19 11:01:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

【答案】应助回帖

1949stone(EPI+1): 来了 2011-05-19 12:31:59
marker 标记一下。
没有条带原因太多了：

1：PCR体系的问题 不知道你有没有进行温度梯度的设定呢？还有你的体系是怎么样的？
2：引物的退火温度和稀释的均匀程度也会影响PCR的效果。

重复做一次。
赞一下(1人) 回复此楼
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
3楼2011-05-19 11:55:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

奔跑的西瓜

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
1949stone(金币+2): 鼓励 2011-05-19 12:33:14
1949stone: 是非特异性 貌似 2011-05-19 12:33:47
貌似是降解了，你检下你的模板DNA吧，看看怎么样，或者是引物非特异性结合了
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2011-05-19 12:23:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[文学芳草园] 两块石头 +7 阿美_Lml888 2026-09-03 10/500 2026-09-06 20:08 by 阿美_Lml888
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 j5mmowWXNWxv 2026-09-05 6/300 2026-09-06 18:41 by eObJPa4gWmp6
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 jPDp0sc2B7zQ 2026-09-05 6/300 2026-09-06 18:09 by eObJPa4gWmp6
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 jPDp0sc2B7zQ 2026-09-05 6/300 2026-09-06 18:01 by eObJPa4gWmp6
[找工作] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 jPDp0sc2B7zQ 2026-09-05 8/400 2026-09-06 17:49 by eObJPa4gWmp6
[教师之家] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 jPDp0sc2B7zQ 2026-09-05 9/450 2026-09-06 17:09 by eObJPa4gWmp6
[考研] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 jPDp0sc2B7zQ 2026-09-04 8/400 2026-09-06 17:09 by eObJPa4gWmp6
[博后之家] 广西大学-广州大学招聘博士后 欢迎广大优秀人才！！！ +5 SCSIOyxguo 2026-09-03 8/400 2026-09-06 15:06 by 可爱小花朵
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 j5mmowWXNWxv 2026-09-05 3/150 2026-09-06 13:09 by eObJPa4gWmp6
[考博] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 j5mmowWXNWxv 2026-09-05 4/200 2026-09-06 12:49 by eObJPa4gWmp6
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 j5mmowWXNWxv 2026-09-05 3/150 2026-09-06 12:49 by eObJPa4gWmp6
[考博] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 j5mmowWXNWxv 2026-09-05 4/200 2026-09-06 12:29 by eObJPa4gWmp6
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 jPDp0sc2B7zQ 2026-09-05 7/350 2026-09-06 11:20 by eObJPa4gWmp6
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 jPDp0sc2B7zQ 2026-09-05 8/400 2026-09-06 11:09 by eObJPa4gWmp6
[论文投稿] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 jPDp0sc2B7zQ 2026-09-04 8/400 2026-09-06 11:00 by eObJPa4gWmp6
[考研] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 jPDp0sc2B7zQ 2026-09-05 4/200 2026-09-06 07:20 by E1iiBLMU2XnD
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +8 CRJ0Aq2FtVH0 2026-09-03 15/750 2026-09-06 05:48 by E1iiBLMU2XnD
[文学芳草园] 初秋的晨风 +4 阿美_Lml888 2026-09-04 6/300 2026-09-05 13:51 by 阿美_Lml888
[基金申请] 学科评审组评审是指会评吗？ +6 瞬息宇宙 2026-08-31 9/450 2026-09-05 13:11 by haizai99
[硕博家园] Ei源刊怎么投 +4 Fengshun9711 2026-09-04 4/200 2026-09-04 19:30 by 研途知予
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭