应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » PCR非特异性扩增
71/1返回列表
查看: 1491  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 BioEPI ，点击这里进行查看

xuqingchun33

银虫 (小有名气)

[求助] PCR非特异性扩增

最近做PCR，非特异性扩增较明显，求助怎么样提高目的条带的扩增效率，减少非特异性条带扩增，谢谢
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
在这个纷绕的世俗世界里，能够学会用一颗平常的心去对待周围的一切，也是一种境界。
1楼 2011-05-18 14:08:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhengfan1109

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
lstt09nk(金币+2): 鼓励交流 2011-05-18 22:10:54
xuqingchun33(金币+1): 一直都存在非特异性条带 2011-05-19 16:26:48
引用回帖:
Originally posted by xuqingchun33 at 2011-05-18 14:08:09:
最近做PCR，非特异性扩增较明显，求助怎么样提高目的条带的扩增效率，减少非特异性条带扩增，谢谢

你是指同一引物原来扩增很好，最近变差还是一直都存在非特异性条带，考虑的因素：
1.引物设计
2. 扩增温度，可以做个梯度PCR看看。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-05-18 21:03:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zwlr116812

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
lstt09nk(金币+2): 鼓励下，欢迎常来 2011-05-19 13:52:37
xuqingchun33(金币+3): 谢谢 2011-05-19 16:27:57
silicare(EPI+1): 2011-05-19 21:30:20
1.重新设计引物
2.减低体系中引物的用量
3.增加模板的量
4.降低循环次数
  
祝实验顺利
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2011-05-19 08:15:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhengfan1109

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
Originally posted by zhengfan1109 at 2011-05-18 21:03:32:
你是指同一引物原来扩增很好，最近变差还是一直都存在非特异性条带，考虑的因素：
1.引物设计
2. 扩增温度，可以做个梯度PCR看看。

那就从2楼和3楼提出的建议入手，祝实验顺利！
赞一下 回复此楼
4楼2011-05-19 18:56:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

apheyh

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

建议使用NCBI 引物设计，因为可以使用后台数据库进行比对，应该可以有效降低非特性产物的问题；设计完成后 再使用oligo 进行分析。
赞一下 回复此楼
5楼2011-05-19 19:09:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

xuqingchun33(金币+1): 我们实验室用的是天根的taq mix和pfu mix 2011-05-20 10:20:25
一个好的PCR酶也是很重要的，最近深有体会。
建议用高保真的Taq酶，
赞一下 回复此楼
6楼2011-05-19 21:20:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)
建议用invitrogen的或者novagen的吧
赞一下 回复此楼
7楼2011-05-20 20:53:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 xuqingchun33 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +8 Tide man 2026-08-11 8/400 2026-08-12 17:30 by Vivilian
[基金申请] 不应该看fileCode +5 且听虎啸 2026-08-12 6/300 2026-08-12 16:26 by Tide man
[基金申请] 好奇怪的filecode +5 布布和一二 2026-08-08 6/300 2026-08-12 16:11 by 云上清扬
[基金申请] filecode +13 documentary 2026-08-10 15/750 2026-08-12 15:56 by 云上清扬
[基金申请] 奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +7 布布和一二 2026-08-10 10/500 2026-08-12 09:12 by 布布和一二
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分？ +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果？ +3 yuleib84 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:53 by jnhyjjm
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的，真有人买论文么？感觉没必要啊 +8 Tide man 2026-08-10 9/450 2026-08-11 20:39 by beefly
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[硕博家园] 读博的好处 +3 lnee 2026-08-11 3/150 2026-08-11 18:10 by 希望我好好的
[基金申请] 听说今天filecode变了 +26 布布和一二 2026-08-06 49/2450 2026-08-11 13:18 by WH3796
[基金申请] 基金中了 +15 laoda193707 2026-08-06 15/750 2026-08-11 00:11 by jiafei2190
[基金申请] 关于代码变化问题，想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] 关于filecode，很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变，有变的大神么？ +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 固定端突然变了，今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭