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烂铁

金虫 (小有名气)


[交流] 关于western blot转膜

最近开始做western blot,但是转膜这一步总是不成功,我用的是半干式转膜法,180mA和1h左右,100mA1.5h都试过了,根据转膜仪上面得说明,转膜时间已经足够了,可是丽春红染色后还是没有条带。
我用的滤纸是普通的滤纸(不是3mm滤纸),这会有影响么?另外我用的PVDF膜已经有一段时间了,这个会不会存在过期的问题?
希望大家帮助,谢谢!!
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小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
我们是湿转   表示压力不大
8楼2011-05-09 21:42:52
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小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
你的膜活化了吗?
2楼2011-05-09 11:57:24
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烂铁

金虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by elvias at 2011-05-09 11:57:24:
你的膜活化了吗?

恩,先用甲醇浸泡,然后用转膜缓冲液浸泡的
3楼2011-05-09 12:01:16
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★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
烂铁(金币+5): 2011-05-09 14:19:25
西瓜(金币+3): 热心噢 2011-05-09 17:55:41
引用回帖:
Originally posted by 烂铁 at 2011-05-09 12:01:16:
恩,先用甲醇浸泡,然后用转膜缓冲液浸泡的

那你有没有预染marker,你可以用一下,看看是否是转膜这步出了问题。
4楼2011-05-09 12:29:58
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