| 查看: 6440 | 回复: 20 | ||||
| 本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看 | ||||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||||
[交流]
关于western blot转膜
|
||||
|
最近开始做western blot，但是转膜这一步总是不成功，我用的是半干式转膜法，180mA和1h左右，100mA1.5h都试过了，根据转膜仪上面得说明，转膜时间已经足够了，可是丽春红染色后还是没有条带。 我用的滤纸是普通的滤纸（不是3mm滤纸），这会有影响么？另外我用的PVDF膜已经有一段时间了，这个会不会存在过期的问题？ 希望大家帮助，谢谢！！ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 【分子生物】EPI帖 |
» 猜你喜欢
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有112人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
-
ALK5 高选择性小分子 LY-3200882：可放大合成路线与质控要点解析
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 关于western blot
已经有2人回复
- 关于western转膜
已经有4人回复
- 关于western blotting
已经有1人回复
- 关于western blot背景太深
已经有5人回复
- 关于Western最后一步X光片显影定影
已经有3人回复
- 求助关于Western blot.
已经有8人回复
- 关于western的显影问题
已经有10人回复
- 关于western blot
已经有4人回复
- 关于western曝光方法求助
已经有2人回复
- 关于western blot 试验
已经有2人回复
- 关于western blot样品制备
已经有8人回复
- 关于western blot
已经有4人回复
- 关于western blot的小问题
已经有12人回复
- 关于western blotting
已经有1人回复
- 关于Western Union transfer
已经有6人回复
- 关于Western抗体选择
已经有1人回复
- 关于western blotting MARKER 的问题
已经有12人回复
- 关于western上样
已经有17人回复
- 关于western blot的一两个实验疑问。
已经有6人回复
- 关于western blot显影液
已经有9人回复
3楼2011-05-09 12:01:16
2楼2011-05-09 11:57:24
4楼2011-05-09 12:29:58
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
烂铁(金币+5): 2011-05-09 14:14:51
西瓜(金币+5, EPI+1): 厉害的新虫噢！偶注意你很久了！ 2011-05-09 17:57:58
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
烂铁(金币+5): 2011-05-09 14:14:51
西瓜(金币+5, EPI+1): 厉害的新虫噢！偶注意你很久了！ 2011-05-09 17:57:58
| 做western blot，一般都是用预染Marker，转膜后如果膜上maker条带清晰的话，你要的蛋白样品一般都会转上的。用丽春红染不上色，很有可能是你样品蛋白含量比较少，条带不清晰，如果你的一抗效价比较高的话，同样能显出条带；还有一种可能就是你用的丽春红溶液用的次数过多，不好用了，如果是这种情况，建议新配一些丽春红染液试一下，不方便的话继续往下做就可以，看看最后结果再说。希望对楼主有所帮助！ |
5楼2011-05-09 13:02:50
30