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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 关于western的显影问题
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nxyangbei

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于western的显影问题 已有3人参与

将条带加入1:1ECLAB液，孵育3min，然后到暗室压片显影，放到显影液中2min才能出现条带，但是这儿时候片子已经全黑了。膜也没有明显的目的条带的荧光，但类似是全部膜条带上都有荧光。二抗是1:5000.菜鸟新手，求助
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1楼 2014-12-10 14:27:22
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-12-12 12:26:14
胶片在定影前被光照过就会黑
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2楼2014-12-10 15:55:09
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yuyelin

木虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by nxyangbei at 2014-12-10 16:23:50
1-2min吧，是不是压片时间不够？...

曝光时间可以长一些，显影时间就可以短一些。
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若嗔若痴，不见风云
9楼2014-12-11 09:18:21
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普通回帖

w1602928049
3楼2014-12-10 16:06:37
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nxyangbei

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2014-12-10 15:55:09
胶片在定影前被光照过就会黑

可是真的没有见光啊，胶片拿出来的时候不是黑的
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4楼2014-12-10 16:07:05
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yuyelin

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-12-12 12:26:18
我也觉得是胶片被曝光了，才会出现胶片会黑的情况。
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若嗔若痴，不见风云
5楼2014-12-10 16:12:08
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nxyangbei

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by yuyelin at 2014-12-10 16:12:08
我也觉得是胶片被曝光了，才会出现胶片会黑的情况。

只是觉得人家都是胶片上有微弱的荧光然后放到显影液几秒就可以显出条带，我的胶片上没有荧光可是放到显影液中几分钟条带也会显出来，只是片子黑了。
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6楼2014-12-10 16:16:48
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yuyelin

木虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by nxyangbei at 2014-12-10 16:16:48
只是觉得人家都是胶片上有微弱的荧光然后放到显影液几秒就可以显出条带，我的胶片上没有荧光可是放到显影液中几分钟条带也会显出来，只是片子黑了。...

你曝光时间多长？
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若嗔若痴，不见风云
7楼2014-12-10 16:21:09
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nxyangbei

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by yuyelin at 2014-12-10 16:21:09
你曝光时间多长？...

1-2min吧，是不是压片时间不够？
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8楼2014-12-10 16:23:50
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louisa俊

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-12-12 12:26:23
首先，建议将显影液和定影液重新配置。其次，在显影液里面漂洗的时候，胶片不要接触到容器壁，我们一般只要在显影液里面放置一分钟。最后一点建议就是，在显影之前，在黑暗条件下，可以盯着条带看，如果条带很亮，显影的时间可以不要太长。如果没有亮光，或者很暗，就可以显影时间长点。
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10楼2014-12-11 15:48:57
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