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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 发酵液中多糖的测定
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286792125

铜虫 (小有名气)

[求助] 发酵液中多糖的测定

现在测发酵液中的真菌多糖，但是优化培养基需要加入淀粉，蔗糖等碳源，如何在最后测多糖的时候排除这些未发酵完的碳源干扰？
如果最后要测还原糖，但是淀粉蔗糖都不是还原糖
请大家帮忙
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1楼2011-04-30 01:57:06
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newtime007

木虫 (正式写手)

成长的微生物

【答案】应助回帖

★
286792125(金币+5): 你好，你说的很对，我再考虑考虑。 2011-04-30 15:45:15
wolfebst(金币+1): 你的回答很好啊，呵呵 2011-04-30 16:31:12
286792125(金币+5): 没人说了 分全给你吧 2011-05-01 12:23:27
首先这类多糖不好测，有干扰，具体参考黄原胶、结冷胶发酵
第二，你其实不是测最后还原糖，而是淀粉，蔗糖水解后的糖，即培养基中总糖的消耗，目前来说也比较麻烦，要考虑酸解过程中会使你的真菌多糖也可能水解。
第三，建议你先用葡萄糖做实验，测真菌多糖，最后只做产量是用其它糖。
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上善若水，水善利万物而不争
2楼2011-04-30 06:42:17
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zhqw423

木虫 (著名写手)
可以参考多糖提取相关的资料，比如加入3倍于发酵液体积的乙醇，多糖会变成絮状，这样可以将多糖粗提出来，烘干称重。

可以用淀粉酶消除淀粉的影响。

PS：个人建议
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大其心，容天下之事；虚其心，受天下之物；平其心，论天下之先；潜其心，观天下之理；定其心，应天下之变。
3楼2011-05-01 21:50:49
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imbest110

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你培养的真菌是不是丝状的，可以过滤出来用双蒸水多次冲洗 烘干后再测多糖
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天道酬勤！
4楼2011-05-02 21:25:26
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286792125

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by imbest110 at 2011-05-02 21:25:26:
你培养的真菌是不是丝状的，可以过滤出来用双蒸水多次冲洗 烘干后再测多糖

谢谢回复，我测的是发酵液里的多糖，胞外多糖。
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5楼2011-05-03 00:21:31
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286792125

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by zhqw423 at 2011-05-01 21:50:49:
可以参考多糖提取相关的资料，比如加入3倍于发酵液体积的乙醇，多糖会变成絮状，这样可以将多糖粗提出来，烘干称重。

可以用淀粉酶消除淀粉的影响。

PS：个人建议

谢谢回复，建议不错。
现在想的是用其它的检测标准优化碳源，然后在一种碳源定量的情况下再优化多糖。
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6楼2011-05-03 00:30:57
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imbest110

银虫 (小有名气)
祝你实验成功
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天道酬勤！
7楼2011-05-03 11:01:37
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a1021

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

测胞外多糖就是测总糖吧？测总糖可以用DNS法测定。
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8楼2011-05-03 21:53:16
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wzhw0417

铜虫 (正式写手)
还是用淀粉酶消化一下，醇沉后，称重好一点的。其他方法误差还是有点大。
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9楼2012-06-05 15:49:18
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倪言

金虫 (小有名气)
引用回帖:
392532楼: Originally posted by zhqw423 at 2011-05-01 21:50:49
可以参考多糖提取相关的资料，比如加入3倍于发酵液体积的乙醇，多糖会变成絮状，这样可以将多糖粗提出来，烘干称重。

可以用淀粉酶消除淀粉的影响。

PS：个人建议

我想请教一下，醇提之后的沉淀（你说的絮状物）就是多糖吗？不是应该是蛋白质吗？而且一般醇提是1:4加95%乙醇，是3倍的吗？
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爱生活爱自己
10楼2013-01-18 11:13:44
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