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nathandeidy

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[求助] 多糖的检测方法

最近在做多糖的检测,样品是中药提取物,用的是苯酚-硫酸法,请问在前处理过程中怎么才能有效的去除单糖和大分子量的杂质化合物。
我有个想法是,用80%醇沉,除去单糖和低聚糖,残渣再用低浓度的醇醇沉,除去大分子量的杂质,取上清即得,不知这样是否可行。
或者有什么更好的前处理方法?
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yhyh96

木虫 (著名写手)


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感谢参与,应助指数 +1
PSA: 金币+1, 谢谢交流 2013-01-17 11:16:21
一般是除蛋白,水提醇沉,这样杂质就比较少了
2楼2013-01-17 08:45:04
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kangding

新虫 (小有名气)

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PSA: 金币+1, 鼓励新虫,常来哦 2013-01-17 11:16:37
nathandeidy: 金币+50, 有帮助 2013-03-30 19:52:08
所谓大分子量的杂质主要是指蛋白质了,所以一般是除蛋白质,醇沉,透析袋透析,这样一般就能得到纯度较高的多糖了
3楼2013-01-17 09:04:47
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mzhyan

至尊木虫 (文坛精英)

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PSA: 金币+1, thx 2013-01-17 11:16:48
第一步肯定是要除蛋白的。
4楼2013-01-17 09:09:47
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sunchunyang8

木虫 (正式写手)

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PSA: 金币+1, 水提醇沉法应该是正解哈哈 2013-01-17 11:17:24
平时我们做的也是用水浸后用酒精沉淀来析出多糖
没有最好只有更好
5楼2013-01-17 09:09:51
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nathandeidy

捐助贵宾 (初入文坛)

因为我做的是测定含量,除蛋白后再醇沉,以葡萄糖为对照计算含量,那这含量是会偏高还是偏低啊?
消失在那一夜的黑雨滂沱
6楼2013-01-17 09:49:13
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yhyh96

木虫 (著名写手)


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一般是低了,步骤越多含量越低
7楼2013-01-17 12:47:12
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pennae8699

木虫 (小有名气)

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karl2100: 金币+1, 谢谢! 2013-01-17 23:45:35
大分子量的应该是蛋白类,可以用sevage法去除;单糖的话,可以透析啊~
8楼2013-01-17 15:46:08
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idea2020

银虫 (小有名气)

期待解决
9楼2013-01-17 22:18:38
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拜仁主义

银虫 (小有名气)

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楼主就是要测用苯酚-硫酸法测中药提取液中多糖的含量吧?苯酚硫酸只会和糖起反应,所以个人觉的只要先用95%的乙醇沉淀,然后通过透析把沉淀里单糖和低聚糖除去就行了。如果用Sevag法去除蛋白的话会损失不少多糖,造成测量结果偏低。
天然药物药理。。。。。。。
10楼2013-01-18 20:29:24
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