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装公子

银虫 (初入文坛)

[求助] 拟南芥RNA提取问题

我的拟南芥分两批种植
一批是种在培养罐里的拟南芥,用MS培养基,提取RNA以后,做RT-PCR,效果还不错,管家基因相差在1个循环以内
另一批是种在土壤里的拟南芥,提取出来的RNA在测浓度和纯度的时候,和培养罐里的差不多,但是做RT-PCR时的管家基因,只有20个样竟然能相差到十个循环,从测浓度到反转录PCR又重做了一遍,结果还是一样;重新取样再做,结果还是很差
不知道大家有没有遇到过相同的情况,给些建议
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世上只有一种英雄主义
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)

引用回帖:
Originally posted by elvias at 2011-04-24 17:08:17:
rt-pcr(是否为real-time?)相差1个循环的话好像也是很大的变化的。。。不过我的感觉是根本不知道你在说什么

约定俗成的,RT-PCR是指反转录PCR(Reverse transcription)。
Real-time PCR简写成qPCR(quantitative PCR)。
5楼2011-04-24 17:15:54
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查看全部 14 个回答

西瓜

荣誉版主 (知名作家)

“只有20个样竟然能相差到十个循环”是管家基因相差大吗?
2楼2011-04-24 16:15:43
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beibei9535

荣誉版主 (职业作家)

晕晕小版主~ 姑娘你好!

优秀版主优秀版主

不好意思啊,我没听懂你的意思?什么叫差几个循环?
最好的年龄是,那一天,终于知道并且坚信自己有多好,不是虚张,不是夸浮,不是众人捧,是内心明明澈澈知道:是的,我就是这么好。
3楼2011-04-24 16:25:20
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elvias

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

rt-pcr(是否为real-time?)相差1个循环的话好像也是很大的变化的。。。不过我的感觉是根本不知道你在说什么
4楼2011-04-24 17:08:17
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