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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 拟南芥RNA提取问题
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装公子

银虫 (初入文坛)

[求助] 拟南芥RNA提取问题

我的拟南芥分两批种植
一批是种在培养罐里的拟南芥，用MS培养基，提取RNA以后，做RT-PCR，效果还不错，管家基因相差在1个循环以内
另一批是种在土壤里的拟南芥，提取出来的RNA在测浓度和纯度的时候，和培养罐里的差不多，但是做RT-PCR时的管家基因，只有20个样竟然能相差到十个循环，从测浓度到反转录PCR又重做了一遍，结果还是一样；重新取样再做，结果还是很差
不知道大家有没有遇到过相同的情况，给些建议
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世上只有一种英雄主义
1楼 2011-04-24 15:54:26
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elvias

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

rt-pcr（是否为real-time？）相差1个循环的话好像也是很大的变化的。。。不过我的感觉是根本不知道你在说什么
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4楼2011-04-24 17:08:17
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elvias

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 西瓜 at 2011-04-24 17:15:54:
约定俗成的，RT-PCR是指反转录PCR（Reverse transcription）。
Real-time PCR简写成qPCR（quantitative PCR）。

所以说我就更看不懂LZ的意思了
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6楼2011-04-24 17:33:14
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elvias

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 西瓜 at 2011-04-24 17:48:50:
坐等楼主补充问题咯~
哥们最近很活跃啊，要不要考虑下应聘版主呢？ 生物科学综合版在招募版主哦

呵呵~~这阵子闲下来了~~有空逛逛论坛了~~嗯~~版主我在考虑考虑哈~~嘿嘿
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10楼2011-04-24 19:22:41
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elvias

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
西瓜(金币+2): good 2011-04-25 18:50:32
如果是持家基因这么大的变化那么你应该考虑是否为RNA提取过程中出现了问题，你的RNA完整性是否好。再有你的引物是否特异。
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14楼2011-04-25 10:01:07
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