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【求助/交流】扩16s rDNA时,以第一次的条带较淡的PCR产物为模板,为什么得不到清晰的
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wish0310
至尊木虫
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虫号: 700299
[交流]
【求助/交流】扩16s rDNA时,以第一次的条带较淡的PCR产物为模板,为什么得不到清晰的
扩革兰氏阴性菌的16s rDNA时(菌体PCR),想得到较亮的条带,以第一次的条带较淡的PCR产物为模板,在同样的条件下,为什么得不到清晰的条带?这个方法以前用过,都很好用。恳请各位指教!
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2011-04-01 09:51:59
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2008228003
铁虫
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wish0310(金币
+1
):谢谢参与
是不是条件不好,目的基因根本没克隆出来,看到的只不过是引物二聚体
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9楼
2011-04-01 12:38:32
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-超越beyond
铁虫
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虫号: 936797
★
wish0310(金币
+1
):谢谢参与
引用回帖:
Originally posted by
wish0310
at 2011-04-01 09:51:59:
扩革兰氏阴性菌的16s rDNA时(菌体PCR),想得到较亮的条带,以第一次的条带较淡的PCR产物为模板,在同样的条件下,为什么得不到清晰的条带?这个方法以前用过,都很好用。恳请各位指教!
体系里可能存在抑制性东西
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3楼
2011-04-01 10:35:23
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wang_xju
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wish0310(金币
+1
):谢谢参与
你稀释模版至少100倍试试,或者更高倍数。
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4楼
2011-04-01 11:11:10
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tigerpaw
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wish0310(金币
+1
):谢谢参与
是不是胶的问题?
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5楼
2011-04-01 11:12:45
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