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wish0310

至尊木虫 (著名写手)

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[交流] 【求助/交流】扩16s rDNA时，以第一次的条带较淡的PCR产物为模板，为什么得不到清晰的

扩革兰氏阴性菌的16s rDNA时（菌体PCR)，想得到较亮的条带，以第一次的条带较淡的PCR产物为模板，在同样的条件下，为什么得不到清晰的条带？这个方法以前用过，都很好用。恳请各位指教！

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1楼 2011-04-01 09:51:59

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wish0310

至尊木虫 (著名写手)

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引用回帖:

Originally posted by 2008228003 at 2011-04-01 12:38:32:
是不是条件不好，目的基因根本没克隆出来，看到的只不过是引物二聚体

第一次的PCR产物是1.5kb左右，条带虽然浅，但还是能看出来的。

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10楼2011-04-01 21:27:32

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-超越beyond

铁虫 (小有名气)

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引用回帖:

Originally posted by wish0310 at 2011-04-01 09:51:59:
扩革兰氏阴性菌的16s rDNA时（菌体PCR)，想得到较亮的条带，以第一次的条带较淡的PCR产物为模板，在同样的条件下，为什么得不到清晰的条带？这个方法以前用过，都很好用。恳请各位指教！

体系里可能存在抑制性东西

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3楼2011-04-01 10:35:23

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