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【求助/交流】求助:5.5KPCR片段连接难,请教!!
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xiaojing459
银虫
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虫号: 301998
[交流]
【求助/交流】求助:5.5KPCR片段连接难,请教!!
求助:我的片段约5.5 K, 连接到pGEM-T载体上,老是连接失败,挑不到阳性克隆,麻烦有经验的帮我想想办法,提些建议,多谢!
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2011-03-31 21:09:08
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susizheng
木虫
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xiaojing459(金币
+3
):谢谢参与
dhd997(金币+2): good 2011-04-01 08:46:26
当时连过4K+的也没成功,不知道是不是T载承载能力不够的原因。
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4楼
2011-03-31 22:15:09
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1949stone
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★
xiaojing459(金币
+3
):谢谢参与
看看 是不是犯了低级错误
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2楼
2011-03-31 21:27:57
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soarfalcon8808
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★
xiaojing459(金币
+3
):谢谢参与
可能操作上有点小问题
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3楼
2011-03-31 22:05:25
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jasco
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xiaojing459(金币
+3
):谢谢参与
dhd997(金币+3): good 2011-04-01 20:01:27
1、连个小片段,做阳性对照,片段不是pfu扩增的吧?
2、延长连接时间到16hours
3、在连接了8hour后加点atp和酶
试试看行不行
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5楼
2011-04-01 09:46:11
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