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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】紧急求助~~ 关于简并引物设计 codehop 和genefisher 在线
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忧游鸟

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】紧急求助~~ 关于简并引物设计 codehop 和genefisher 在线

求助关于简并引物设计的问题，希望各位大虾帮忙

   本人做的是漆酶基因多样性的东西，这是dnaman中比对的ncbi 下载的序列，有四个部分出现的保守区域还是不少，命名为1 2 3 4，放到codehop中之后要自己肉眼判断保守区域的那一段 然后手动设计引物么？？学环境的 好多东西实在是不懂~~ 希望大家不吝赐教啊~

[ Last edited by 忧游鸟 on 2011-3-31 at 20:28 ]
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1楼 2011-03-24 20:20:36
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csdyg

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
1364427楼: Originally posted by hraikeyan at 2012-09-05 20:39:17
您好，我用codehop设计的简并引物在线显示TM为60.8，可是合成以后，合成单子上变成了70.是不是codghop在线显示的TM值不准啊。还有TM在70左右的兼并引物是不是扩增不出来目标条带啊？...

CODEHOP和公司合成后的TM都是预估的，特别是简并引物的TM。一般在使用简并引物扩增的时候，TM并不适用，多数时候选择较低的annealing temparature.
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13楼2012-09-06 16:21:13
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csdyg

木虫 (正式写手)
★
1949stone(金币+1): 呵呵 不错 2011-03-28 10:35:47
我有一些这方面的经验，codehop用了几次，还不错，这会没时间，等我下了班回去再给你说，或者你能详细说你一下你的情况

[ Last edited by csdyg on 2011-3-26 at 19:09 ]
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2楼2011-03-26 01:13:29
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csdyg

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
dhd997(金币+3): 很热心，在这里讨论不方便吗？ 2011-03-26 08:49:06
忧游鸟(金币+20): 2011-03-26 11:06:43
在CODEHOP里粘贴进你要比对的序列，生成比对结果之后，用引物设计，软件会自动在保守区序列上生成引物。

但是生成的引物效率并不一定很高，根据我的经验，你最好人工检查，然后根据codehop的基本设计原则自己设计引物
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3楼2011-03-26 05:11:41
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忧游鸟

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by csdyg at 2011-03-26 05:11:41:
在CODEHOP里粘贴进你要比对的序列，生成比对结果之后，用引物设计，软件会自动在保守区序列上生成引物。

但是生成的引物效率并不一定很高，根据我的经验，你最好人工检查，然后根据codehop的基本设计原则自己设 ...

是的 就是放进去比对了之后又很多什么block unknown A B C D E  之类的了 然后分值都是六十多 最后还是要根据自己的保守区域来选取么  需要反过来查找相应的碱基序列来选择密码子的偏好性的碱基么
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4楼2011-03-26 11:19:22
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