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夏尔list

金虫 (著名写手)


[交流] 【求助/交流】构建GUS载体的问题

构建GUS载体时,为什么有的是连接整个基因(没有终止子),而有的是直接连接启动子序列就行了啊?刚开始做这个东西,谢谢大家了
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anik

银虫 (正式写手)



翱宇(金币+1): 鼓励交流 2011-02-16 13:03:06
你的问题没有说清楚。

有的载体有启动子和终止子,直接把目的基因插入其中即可,如pBI121
有的载体没有启动字和终止子,需要把目的基因两端连接上启动子和终止子后再连接至载体中,如pCAMBIA系列的载体。
2楼2011-02-11 12:41:06
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shaquila

金虫 (正式写手)


夏尔list(金币+2): 2011-02-11 17:53:58
适合不同要求,楼上已经说的很明确拉,pCAMBIA载体如果直接连的话,也可以把report gene给替换掉~~
3楼2011-02-11 16:00:52
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夏尔list

金虫 (著名写手)


引用回帖:
Originally posted by shaquila at 2011-02-11 16:00:52:
适合不同要求,楼上已经说的很明确拉,pCAMBIA载体如果直接连的话,也可以把report gene给替换掉~~

谢谢啦。!那我再问下连基因的话一般是连接全长还是连接cDNA啊?谢谢了!
4楼2011-02-15 15:16:10
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QIAO4984

铜虫 (小有名气)



翱宇(金币+1): 鼓励交流 2011-02-16 13:03:26
夏尔list(金币+1): 2011-02-16 13:32:11
连 启动子 是启动子融合

连基因是蛋白融合

如果相同物种转基因 应该DNA就可以

如果是不同物种 应该CDNA  

不同物种转录后RNA剪切体系不一样
5楼2011-02-16 12:04:56
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QIAO4984

铜虫 (小有名气)


夏尔list(金币+1): 谢谢哈~ 2011-02-16 13:32:21
启动子融合  只能看初步表达位置

蛋白融合   表达位置精确
6楼2011-02-16 12:06:07
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夏尔list

金虫 (著名写手)


引用回帖:
Originally posted by QIAO4984 at 2011-02-16 12:04:56:
连 启动子 是启动子融合

连基因是蛋白融合

如果相同物种转基因 应该DNA就可以

如果是不同物种 应该CDNA  

不同物种转录后RNA剪切体系不一样

如果这2000bp中又包含了上游某个基因的一部分呢?那么这一部分算是启动子区域么?

[ Last edited by 夏尔list on 2011-2-18 at 14:45 ]
7楼2011-02-18 14:17:35
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QIAO4984

铜虫 (小有名气)



没听明白你的意思   你2000是包含了启动子序列和基因序列,以及上个基因的后面一部分么?  

能否说清楚一下?
8楼2011-02-19 08:53:24
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QIAO4984

铜虫 (小有名气)


夏尔list(金币+1): 2011-02-19 10:58:01
引用回帖:
Originally posted by 夏尔list at 2011-02-18 06:17:35:
如果这2000bp中又包含了上游某个基因的一部分呢?那么这一部分算是启动子区域么?

[ Last edited by 夏尔list on 2011-2-18 at 14:45 ]

如果你没弄错的话  包含了上游基因肯定不要的啊
9楼2011-02-19 08:55:15
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