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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】T-RFLP酶切产物存放时间问题
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wuzunfeng416

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】T-RFLP酶切产物存放时间问题已有5人参与

在T-RFLP分析时，酶切产物在-20摄氏度放多久？
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1楼2010-12-27 14:51:01
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树宝宝zyx

新虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
楼主你好，我也在做T-RFLP，PCR产物约1.5KB，然后做胶回收，可是产量一直不高，达不到酶切需要的浓度，做的酶切也不太成功，我选择的是MspI和RsuRI的双酶切，在37°C反应了5个小时，可是电泳后看条带变成了模糊一片。不知你怎么做的，能否请教点经验。。。谢谢
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科研真辛苦！
3楼2011-11-15 20:58:56
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liminsun_0

金虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你的酶切产物要保存，还要怎么处理呀？还有进行下一步操作吗？我的酶切产物都跑电泳用完了。
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既然选择了远方，便只顾风雨兼程。
2楼2010-12-27 15:43:20
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j2

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
wanhscn(金币+2): 鼓励应助 2011-11-17 00:18:06
引用回帖:
3楼: Originally posted by 树宝宝zyx at 2011-11-15 20:58:56:
楼主你好，我也在做T-RFLP，PCR产物约1.5KB，然后做胶回收，可是产量一直不高，达不到酶切需要的浓度，做的酶切也不太成功，我选择的是MspI和RsuRI的双酶切，在37°C反应了5个小时，可是电泳后看条带变成了模糊一 ...

说明你切开了啊。只是，不晓得的确是相近条带太多，电泳跑不开，还是酶加多了
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修炼ｉｎｇ，当虫仙……
4楼2011-11-16 21:03:03
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树宝宝zyx

新虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by j2 at 2011-11-16 21:03:03:
说明你切开了啊。只是，不晓得的确是相近条带太多，电泳跑不开，还是酶加多了

哦，可能没跑开也有原因吧，那我再试试，要是不行再请教，O(∩_∩)O谢谢啊
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科研真辛苦！
5楼2011-11-17 09:24:46
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