应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助/交流】免疫荧光的问题 。。
181/1返回列表
查看: 2799  |  回复: 17
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

tanqian124

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】免疫荧光的问题 。。

我做的是脑组织中受体蛋白的定性试验，二抗用的是FITC标记的，然后用荧光显微镜观察，用的蓝色通道，为什么视野中一片漆黑啊。。。

是不是显微镜操作的问题呢，我是现先在常光下用10X找到我需要的脑区，然后换成40X的定位视野，然后把常光关掉，调到蓝色通道，为什么看不到呢？是不是还要调节什么呢。。

请大家指教一下 很急啊。。。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2010-12-19 09:30:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
tanqian124(金币+1):谢谢参与
dhd997(金币+1):GOOD 2010-12-19 10:14:43
tanqian124(金币+1): 2010-12-19 13:59:29
FITC不是黄绿色的么……
另外FITC淬灭很快的，要严格避光，有必要的话还得加抗淬灭剂
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2010-12-19 10:04:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tanqian124

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-12-19 10:04:53:
FITC不是黄绿色的么……
另外FITC淬灭很快的，要严格避光，有必要的话还得加抗淬灭剂

恩 对它发出的光是绿色的 但是 要用蓝色光道激发它
赞一下 回复此楼
3楼2010-12-19 13:59:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
dhd997(金币+1):有道理 2010-12-19 15:52:08
tanqian124(金币+1): 2010-12-20 22:15:12
tanqian124(金币+1): 2011-01-14 15:21:10
引用回帖:
Originally posted by tanqian124 at 2010-12-19 13:59:22:

恩 对它发出的光是绿色的 但是 要用蓝色光道激发它

哦哦~可能不同显微镜标识的不一样
另外我觉得你可以做个阳性对照
看看是不是抗体本身的问题，以及是不是你方法学的问题
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2010-12-19 15:24:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tanqian124

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-12-19 15:24:17:


哦哦~可能不同显微镜标识的不一样
另外我觉得你可以做个阳性对照
看看是不是抗体本身的问题，以及是不是你方法学的问题

我看的是5——HT3B受体的表达 可能是这个3B的问题吧 因为他们做PCRwestern 都不是很好出结果。。。我再试试吧
赞一下 回复此楼
5楼2010-12-20 22:16:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuanzhiqin.119

至尊木虫 (著名写手)
★
tanqian124(金币+1):谢谢参与
tanqian124(金币+1): 2011-01-14 15:21:16
淬灭没那么快，但是，我想是不是你们操作有问题，应该用FITC的绿光快或者GFP的滤光块吧。
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2010-12-20 22:41:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhfb619ncu

金虫 (小有名气)
★
tanqian124(金币+1):谢谢参与
tanqian124(金币+1): 2011-01-14 15:21:26
我想除了操作的问题外，会不会你用的FITC过期了，或者是受污染了，导致视线模糊呢
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2010-12-22 12:47:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zjp85

新虫 (初入文坛)

求助：在体荧光检测老鼠肿瘤，是检测哪些指标

★
tanqian124(金币+1):谢谢参与
实验中要用活体荧光成像技术来检测肿瘤，请各位指教有哪些指标可以做为检测的依据?
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2010-12-22 16:13:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lw582482481

铜虫 (初入文坛)
★
tanqian124(金币+1):谢谢参与
焦距对吗
回复此楼
10楼2011-06-29 19:46:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

luoyubin

铜虫 (初入文坛)
★
tanqian124(金币+1):谢谢参与
确保抗体没问题，选择的激发光正确的前提下，试试提高曝光强度，和提高抗体浓度！
赞一下(1人) 回复此楼
11楼2011-06-30 06:35:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yixinling

金虫 (正式写手)
★
tanqian124(金币+1):谢谢参与
引用回帖:
Originally posted by tanqian124 at 2010-12-19 09:30:47:
我做的是脑组织中受体蛋白的定性试验，二抗用的是FITC标记的，然后用荧光显微镜观察，用的蓝色通道，为什么视野中一片漆黑啊。。。

是不是显微镜操作的问题呢，我是现先在常光下用10X找到我需要的脑区，然后换 ...

在楼上各兄弟基础上再补充一点，荧光弱有的时候是自己眼睛的原因，把实验室其他光源都关掉，这样瞳孔能大点儿，有时候就能看到了，另外如果是外接了电脑的显微镜，把档打到目镜，减少分光，也能有不错的改观。
赞一下(1人) 回复此楼
12楼2011-06-30 08:36:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

happy小屁

新虫 (初入文坛)
★
tanqian124(金币+1):谢谢参与
我想问下，那个抗荧光淬灭封片剂从4度拿出来滴一滴  太粘稠了，可不可以少水浴一会啊？各位大虾都是怎么处理的啊。谢谢~~
赞一下(1人) 回复此楼
13楼2011-12-29 16:16:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xueaiw

铁虫 (小有名气)
★
tanqian124(金币+1): 谢谢参与
解决了吗？
回复此楼
16楼2012-05-08 16:19:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

废哥117

银虫 (小有名气)
★
tanqian124(金币+1): 谢谢参与
在10X视野中找到目标后直接调到40X后焦距有可能不对，所以你要再调一下，另外也有可能是你的FITC不行，做阳性对照看看
赞一下 回复此楼
17楼2012-05-30 13:41:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

springCCC

新虫 (初入文坛)
★
tanqian124(金币+1): 谢谢参与
你确定目镜开了吗？？
赞一下 回复此楼
18楼2015-02-11 21:35:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
6931375469楼
2011-06-25 15:13   回复  
tanqian124(金币+1):谢谢参与
foxmygod14楼
2012-04-24 21:38   回复  
tanqian124(金币+1): 谢谢参与
zhaoweigang15楼
2012-05-03 15:15   回复  
tanqian124(金币+1): 谢谢参与
相关版块跳转 我要订阅楼主 tanqian124 的主题更新
181/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料调剂 +14 一样YWY 2026-04-02 15/750 2026-04-08 22:40 by 猪会飞
[考研] 296求调剂 +3 汪！？！ 2026-04-08 3/150 2026-04-08 22:00 by zhouyuwinner
[考研] 288求调剂，一志愿华南理工大学071005 +11 ioodiiij 2026-04-08 11/550 2026-04-08 16:48 by tjzhao
[考研] 一志愿南昌大学，085600，344分求调剂 +11 调剂上岸玘 2026-04-05 12/600 2026-04-08 16:17 by luoyongfeng
[考研] 考研调剂 +11 冰冰，，， 2026-04-07 11/550 2026-04-08 15:08 by Delta2012
[考研] 电子信息346 +4 zuoshaodian 2026-04-08 4/200 2026-04-08 11:54 by zzucheup
[考研] 一志愿太原理工大学计算机技术专硕348，求调剂指导 +3 nexious 2026-04-05 3/150 2026-04-07 08:19 by jp9609
[考研] 一志愿北交大材料工程总分358求调剂 +10 cs0106 2026-04-05 12/600 2026-04-06 19:41 by 无际的草原
[考研] 生物学学硕求调剂：351分一志愿南京师范大学生物学专业 +6 …～、王…～ 2026-04-06 7/350 2026-04-06 18:54 by macy2011
[考研] 机械专硕274求调剂，不挑专业学校 +6 泛泛2333 2026-04-05 8/400 2026-04-06 18:06 by 泛泛2333
[考研] 求调剂到材料 +5 程9915 2026-04-06 5/250 2026-04-06 15:21 by yulian1987
[考研] 专硕304找调剂，一线城市最好 +3 李lsl李 2026-04-05 3/150 2026-04-06 12:16 by ffffjjjj
[考研] 求调剂 +10 chenxrlkx 2026-04-05 10/500 2026-04-06 11:31 by 猪会飞
[考研] 301求调剂 +3 XYPLR 2026-04-05 4/200 2026-04-05 19:07 by XYPLR
[考研] 调剂 +8 熊二想上岸 2026-04-04 8/400 2026-04-05 05:27 by houyaoxu
[考研] 环境285分，过六级，求调剂 +10 xhr12 2026-04-02 10/500 2026-04-04 21:53 by bn53987
[考研] 085600调剂 +4 1amJJ 2026-04-02 4/200 2026-04-04 21:53 by hemengdong
[考研] 材料383求调剂 +5 郭阳阳阳成 2026-04-04 5/250 2026-04-04 19:06 by dongzh2009
[考研] 322求调剂 +4 FZAC123 2026-04-03 4/200 2026-04-03 20:55 by zhq0425
[考研] 315分 085602 求调剂 +15 26考研上岸版26 2026-04-02 15/750 2026-04-03 12:45 by xingguangj
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭