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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 想问个关于荧光苯胺蓝染色的问题
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wansanlian

金虫 (小有名气)

[求助] 想问个关于荧光苯胺蓝染色的问题

想问下大家一个很简单的问题，就是在我们用苯胺蓝来检测胼胝质的形成的时候，他会说在395nm激发波长及495nm发射波长条件下的时候来观察染色的叶片，想问下激发波长指的是在哪个地方？发射波长指的又是哪个呢？
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乱花渐欲迷人眼
1楼 2012-06-09 18:07:46
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

zhengbijuan

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你是观察叶片的？叶片我可能就不是很清楚了，我之前是用苯胺蓝观察花粉管生长，后面看到荧光了。关键看你是用什么显微镜，我之前是用奥林巴斯x51的，只要用紫外的就可以。后来借用尼康倒置荧光显微镜，用g的滤光片可以看到。主要得看你软化脱色充分不。
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8楼2012-12-13 12:12:13
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草溪河

铁虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

苯胺蓝染色一般用紫外激发就行了
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3楼2012-08-12 23:30:57
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kingjo43

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by zhengbijuan at 2012-12-13 12:12:13
你是观察叶片的？叶片我可能就不是很清楚了，我之前是用苯胺蓝观察花粉管生长，后面看到荧光了。关键看你是用什么显微镜，我之前是用奥林巴斯x51的，只要用紫外的就可以。后来借用尼康倒置荧光显微镜，用g的滤光片可 ...

你好、我现在就在做花粉管的观察实验、我有很多问题需要你的帮助，请问你用的苯胺蓝是水溶的还是酸溶的呢？我的是水溶的，1g用1L的0.1M磷酸钾来溶、但是颜色不是很确定、水溶性苯胺蓝溶于水是蓝色的、溶于磷酸钾是紫黑色的、过了七个小时后发现变成绿色的？正常吗？如何正确的使用苯胺蓝溶液呢？
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10楼2013-06-02 00:44:34
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zhengbijuan

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
11楼: Originally posted by zhonglingzi at 2013-08-27 09:03:47
请问，软化和脱色是否充分怎么来判断呢...

软化没有具体的判断，我那时候也是大概试验一下，组织差不多半透明就可以。苯胺蓝染色后只要漂洗下不需要怎么脱色的
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12楼2013-08-29 00:36:20
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lihui_2004

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
荧光显微镜都有几个波段，只需要调到合适的“档”上就可以，你把显微镜说明书看一下，每个档位代表什么就知道了。
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Dream what you want to dream, go where you want to go, be what you want to be.
2楼2012-06-10 20:30:24
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wansanlian

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lihui_2004 at 2012-06-10 20:30:24
荧光显微镜都有几个波段，只需要调到合适的“档”上就可以，你把显微镜说明书看一下，每个档位代表什么就知道了。

嗯.自己倒是没有注意那么多呢
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乱花渐欲迷人眼
4楼2012-08-15 22:15:43
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wansanlian

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 草溪河 at 2012-08-12 23:30:57
苯胺蓝染色一般用紫外激发就行了

一般的紫外激发吗?我们一般情况下就是汞灯的呢,那这种的激发光,还需要有显微镜上面有滤光片的吧
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乱花渐欲迷人眼
5楼2012-08-15 22:16:31
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草溪河

铁虫 (著名写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by wansanlian at 2012-08-15 22:16:31
一般的紫外激发吗?我们一般情况下就是汞灯的呢,那这种的激发光,还需要有显微镜上面有滤光片的吧...

需要的。像我们用的Olympus显微镜的滤光片有“紫外”的，有“蓝光”、“绿光”的，一般调到“紫外”就行了
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wansanlian
6楼2012-08-16 22:36:21
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wansanlian

金虫 (小有名气)
送鲜花一朵
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6楼: Originally posted by 草溪河 at 2012-08-16 22:36:21
需要的。像我们用的Olympus显微镜的滤光片有“紫外”的，有“蓝光”、“绿光”的，一般调到“紫外”就行了...

我们的是OLYMBUS XH51的,好像也是有那么几个的滤光片,那所说的激发的位置是在哪里啊?就是荧光汞灯的吗?>
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乱花渐欲迷人眼
7楼2012-08-17 23:56:57
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wansanlian

金虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by zhengbijuan at 2012-12-13 12:12:13
你是观察叶片的？叶片我可能就不是很清楚了，我之前是用苯胺蓝观察花粉管生长，后面看到荧光了。关键看你是用什么显微镜，我之前是用奥林巴斯x51的，只要用紫外的就可以。后来借用尼康倒置荧光显微镜，用g的滤光片可 ...

我的也是用的OLYMBUS　BH51,不过不懂为什么持到的都不怎么好看　，用的是也是UV。，
但是看的不好，可能是不在黑暗条件下看的原因。
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乱花渐欲迷人眼
9楼2012-12-13 18:56:43
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