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zp198803

金虫 (小有名气)

[求助] FITC标记蛋白的问题

请问FITC标记蛋白的过程中,使用DMSO溶解FITC,然后加入蛋白质溶液,这里DMSO的加入会不会破坏蛋白质的结构,导致蛋白质失活?如果会破坏蛋白质的构象,那么应该用什么溶解FITC???
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xhjggl

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


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mwyuer: 金币+1, 感谢回帖交流 2012-04-17 08:51:02
HOOK™ Dye Labeling Kit (FITC)
蛋白FITC标记试剂盒
Description:
FITC (fluorescein isothiocyanate) is a commonly used fluorescent label for proteins, as it contains the groups required for conjugating to amino, sulfhydryl, imidazoyl, tyrosyl or carbonyl groups of proteins. FITC has a molecular weight of 389, and excitation and emission wavelengths of 494nm and 520nm, respectively, therefore emitting green visible light.This kit utilizes Tube-O-Reactor™, which allows for the reactions to be performed in a single tube, with no loss of essential reagents and minimum hands-on time and effort.
Features:
Dye preweighed and supplied in single use  vials (Also available separately);Suitable for most proteins;Utilizes single Tube Reactor for minimum hands on time.application for Labeling of a green fluorescent dye to proteins and peptides. And Suitable for antibody labeling. Store: -15~-20℃
编号        包装        价格        产地
786-059           5 Reactions        2,709        GBios
7楼2012-04-16 22:54:04
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普通回帖

liuanan

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
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mwyuer: 金币+1, 感谢回帖交流 2012-04-16 16:39:59
zp198803: 金币+5 2012-04-16 16:56:43
水溶液-缓冲液,要注意合适的pH值,很简单的
2楼2012-04-16 16:32:54
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zp198803

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by liuanan at 2012-04-16 16:32:54:
水溶液-缓冲液,要注意合适的pH值,很简单的

PH=8的PBS怎么可行么?是要保持弱碱性吧?
3楼2012-04-16 16:56:35
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匿名

用户注销 (著名写手)



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mwyuer: 金币+1, 感谢回帖交流 2012-04-16 18:23:58
本帖仅楼主可见
4楼2012-04-16 17:51:55
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liuanan

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖


lixiangde: 金币+1, 感谢回帖交流 2012-04-18 09:50:13
引用回帖:
3楼: Originally posted by zp198803 at 2012-04-16 16:56:35:
PH=8的PBS怎么可行么?是要保持弱碱性吧?

我记得是可以的,你仔细查找一下相关文献,照着做就行了,不要加有机溶剂,会引起蛋白质变性
5楼2012-04-16 17:56:48
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晚香玉

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


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mwyuer: 金币+1, 感谢回帖交流 2012-04-17 08:50:52
目前文献上以DMSO为主~

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

6楼2012-04-16 21:25:01
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zp198803

金虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by 晚香玉 at 2012-04-16 21:25:01:
目前文献上以DMSO为主~

求文献出处。。。啊啊!!
8楼2012-04-17 10:25:24
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zp198803

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by yoyosnda at 2012-04-16 17:51:55:
FITC不是直接就溶于水么?不容的话,你加一点乙醇溶解然后分散到水里,不就好了

单纯溶于水中,异硫氰酸会水解的吧
9楼2012-04-17 10:26:26
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晚香玉

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
lixiangde: 金币+1, 感谢回帖交流 2012-04-18 09:50:33
zp198803: 金币+5 2012-04-20 10:18:26
引用回帖:
8楼: Originally posted by zp198803 at 2012-04-17 10:25:24:
求文献出处。。。啊啊!!

这个就不必纠结了,文献太多了,数据库搜一下就行了!
FITC长时间容在水中会腐蚀水解的~
DMSO可以加速溶解兼保护剂作用,长期放置-70°冻存!
10楼2012-04-17 12:40:11
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