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梦想与现实共舞木虫 (正式写手)
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FITC标记蛋白中的Sephadex G25柱
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| 我想用荧光标记蛋白，现在从网上找到一些实验方法大致相同，其中最后一步都是用Sephadex G25柱除去游离荧光素，有的在这一步前面有加透析，有的没有。我现在的疑问是Sephadex G25柱除了可以除去游离的荧光素，还有什么作用？我知道透析可以将小分子的FITC除去，如果Sephadex G25柱仅是除FITC，那么用透析不就可以了吗？非得要用Sephadex G25柱吗? |
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【答案】应助回帖
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lixiangde(金币+2): 感谢回帖交流 2011-05-19 18:08:21
梦想与现实共舞(金币+10): 请问每次透析所需的溶液要有多少合适？比如5ml的溶液，透析液要多少呢？ 2011-05-19 21:56:19
lixiangde(金币+2): 感谢回帖交流 2011-05-19 18:08:21
梦想与现实共舞(金币+10): 请问每次透析所需的溶液要有多少合适？比如5ml的溶液，透析液要多少呢？ 2011-05-19 21:56:19
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G25柱和透析的目的都是除去没修饰到蛋白上的游离荧光分子，二者用一个就行了 G25柱实验时间比较短，但装柱，和检测都比较麻烦，最好有AKTA仪器做起来比较方便 透析做起来比较简单，根据你的蛋白和荧光素的分子量选择适当分子量的透析袋，透析1-2天也几乎能去除游离的荧光分子，透析溶液要用蛋白的缓冲液，刚开始透析的时候多换几次液 |
2楼2011-05-19 16:19:41
ashui001
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