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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » sephadex G-25柱 蛋白质分离
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710925627

木虫 (小有名气)

[交流] sephadex G-25柱 蛋白质分离已有7人参与

小弟现在在做有关过sephadex-25柱的实验，望各位前辈不吝赐教关于如何做sephadex -25的柱子，以及运用


PS  小弟做的蛋白质质量在66000左右
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点点滴滴做起，点点滴滴收获。
1楼2011-09-14 16:11:20
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辉辉集团

银虫 (正式写手)
★
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wanhscn: 鼓励应助回答！ 2011-09-15 09:13:02
如何做sephadex -25的柱子?
那么除了你的目的蛋白外还有什么物质呢？多大分子量
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2楼2011-09-14 16:14:55
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wlt728

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
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西瓜(金币+1): 欢迎交流 2011-09-15 13:04:16
G25的分离范围在1000-5000。我们一般只用于除盐。分离蛋白的效果不太好。
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I am not a hero , but I served with heroes！
3楼2011-09-15 10:35:04
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710925627

木虫 (小有名气)
我做的产物里有BSA分子量大概在66000，以及偶联物分子量为70000左右，我这样做的目的是将小分子物质分离出去，小分子的分子量为280.
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4楼2011-09-16 09:02:14
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labrat

木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★
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西瓜(金币+3): Good！ 2011-09-16 17:43:59
Gel filtration chromatography separates proteins in order of large to small molecules.

In general, large proteins will not enter the gel pores and will elute rapidly from the column in the void volume. Smaller proteins will repeatedly enter and leave the pores of the gel and therefore will remain longer in the column. Hence, proteins will elute in order of decreasing molecular size.

Commercially Available Gel Filtration (GF) Gel Matrix
Gel Type  =  Fractionation Range (molecular weight)
Sephadex G-10 = <700
Sephadex G-25 = 1,000-5,000
Bio-Gel P-60 = 3,000-60,000
Sephadex G-75 = 3,000-70,000
Sephadex G-100 = 4,000-100,000
Bio-Gel P-100 = 5,000-100,000
Sephadex G-200 = 5,000-250,000
Bio-Gel P-200 = 30,000-200,000
Sephacryl S-300 = 10,000-1,500,000
Sepharose 2B = 70,000-40,000,000
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5楼2011-09-16 11:14:51
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710925627

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 辉辉集团 at 2011-09-14 16:14:55:
如何做sephadex -25的柱子?
那么除了你的目的蛋白外还有什么物质呢？多大分子量

我做的产物里有BSA分子量大概在66000，以及偶联物分子量为70000左右，我这样做的目的是将小分子物质分离出去，小分子的分子量为280.
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6楼2011-09-20 09:11:13
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710925627

木虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by labrat at 2011-09-16 11:14:51:
Gel filtration chromatography separates proteins in order of large to small molecules.

In general, large proteins will not enter the gel pores and will elute rapidly from the column in the voi ...

那具体怎么装这个柱子啊   小弟我没有装过  不知道大虾能否指点小弟一二
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7楼2011-09-20 09:12:05
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辉辉集团

银虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by 710925627 at 2011-09-20 09:11:13:
我做的产物里有BSA分子量大概在66000，以及偶联物分子量为70000左右，我这样做的目的是将小分子物质分离出去，小分子的分子量为280.

从分离原理来讲 是可以的哈
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8楼2011-09-20 10:50:23
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
★
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分子筛装柱的问题已解决，请查阅论坛旧帖。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
9楼2011-09-20 19:50:59
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710925627

木虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-09-20 19:50:59:
分子筛装柱的问题已解决，请查阅论坛旧帖。

我没有检索到相关的信息，不知大虾可否发我一篇啊。。。。。
710925627@qq.com
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10楼2011-09-28 14:16:04
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