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梦想与现实共舞

木虫 (正式写手)

[求助] FITC标记蛋白中的Sephadex G25柱

我想用荧光标记蛋白,现在从网上找到一些实验方法大致相同,其中最后一步都是用Sephadex G25柱除去游离荧光素,有的在这一步前面有加透析,有的没有。我现在的疑问是Sephadex G25柱除了可以除去游离的荧光素,还有什么作用?我知道透析可以将小分子的FITC除去,如果Sephadex G25柱仅是除FITC,那么用透析不就可以了吗?非得要用Sephadex G25柱吗?
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baicai1487

铁虫 (小有名气)

红舟流星: 欢迎新虫来生物材料板块交流,有问题可以开新帖询问 2013-11-28 12:13:15
引用回帖:
2楼: Originally posted by ashui001 at 2011-05-19 16:19:41
G25柱和透析的目的都是除去没修饰到蛋白上的游离荧光分子,二者用一个就行了
G25柱实验时间比较短,但装柱,和检测都比较麻烦,最好有AKTA仪器做起来比较方便
透析做起来比较简单,根据你的蛋白和荧光素的分子量选 ...

高手,您好!能否问您一个问题,我最近在做一个植物的总蛋白,您说透析要用缓冲盐,用蒸馏水不行吗?我的总蛋白得除盐和小分子化合物,用PBS缓冲液透析除盐,再过道G25分离柱除小分子,我就想过了道G25分离柱后蛋白不是都在水溶液里了,还稳定吗
8楼2013-11-28 10:29:13
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