应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 综合其他 » 做壳聚糖的FITC标记，如何测FITC结合含量？
111/2返回列表12下一页
查看: 3828  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

气沉丹田

木虫 (小有名气)

[求助] 做壳聚糖的FITC标记，如何测FITC结合含量？

最大的问题是壳聚糖只能在酸性环境下溶解，大于7.4就沉淀出来。而FITC又必须在碱性环境下才有强荧光。用分光光度计粗略测量时候，结合了FITC的壳聚糖的A值很高，但是做FITC的标准曲线A值却很低（用1%醋酸和甲醇1:1混合试剂溶解），测得的样品含FITC量都比反应时加的FITC高，为什么呢？和糖结合了反而不容易淬灭了么？现在要去做荧光检测，会有不同吗？
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

new drug

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-12-23 10:12:26
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huquan0_0

捐助贵宾 (正式写手)
你考虑下有没有必要来定量，如果只是用来示踪，就没有必要那么认真。标记后也可以看到有没有进入细胞之内的。

如果像你说的那样是ph的原因导致的，你也可以尝试下罗丹明这样的染料，或者其他的对ph不敏感的染料。
赞一下 回复此楼
海纳百川有容乃大；自强不息止于至善。
2楼2011-12-23 14:05:57
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

气沉丹田

木虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by huquan0_0 at 2011-12-23 14:05:57:
你考虑下有没有必要来定量，如果只是用来示踪，就没有必要那么认真。标记后也可以看到有没有进入细胞之内的。

如果像你说的那样是ph的原因导致的，你也可以尝试下罗丹明这样的染料，或者其他的对ph不敏感的染料。

定量还是有必要的，需要通过测定FITC含量计算壳聚糖含量。做荧光在很低的含量下好像还可以。但是稀释起来太麻烦了。
赞一下 回复此楼
3楼2011-12-24 08:29:51
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nanocyq

木虫 (著名写手)
楼主是怎么反应连接的   怎么去除未反应的FITC的
赞一下 回复此楼
4楼2011-12-24 09:15:20
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

气沉丹田

木虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by nanocyq at 2011-12-24 09:15:20:
楼主是怎么反应连接的   怎么去除未反应的FITC的

直接混匀振荡反应24小时，碱沉淀，离心，70%乙醇溶液多次洗涤。结合的还是很明显。
赞一下 回复此楼
5楼2011-12-25 23:22:29
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

奇幻之旅

木虫 (小有名气)
★
mwyuer: 金币+1, 欢迎常来生物材料版 2012-07-16 08:06:46
楼主还会回复么，壳聚糖不好溶，你是用什么做溶剂反应24小时的，是1%醋酸和水吗，会对原料有影响吗？
赞一下 回复此楼
6楼2012-07-15 23:06:40
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

气沉丹田

木虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 奇幻之旅 at 2012-07-15 23:06:40
楼主还会回复么，壳聚糖不好溶，你是用什么做溶剂反应24小时的，是1%醋酸和水吗，会对原料有影响吗？

用醋酸稀溶液，0.6%，1%都用过。最后还是用的0.6%的。你意思是对什么原料？做药物的时候，对药物结合什么的没什么影响。
赞一下 回复此楼
7楼2012-07-16 06:42:51
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

奇幻之旅

木虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 气沉丹田 at 2012-07-16 06:42:51
用醋酸稀溶液，0.6%，1%都用过。最后还是用的0.6%的。你意思是对什么原料？做药物的时候，对药物结合什么的没什么影响。...

先谢下楼主，我看好多做FITC都要在碱性条件下，醋酸中也可以做得上吗？
赞一下 回复此楼
8楼2012-07-18 09:50:38
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

气沉丹田

木虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 奇幻之旅 at 2012-07-18 09:50:38
先谢下楼主，我看好多做FITC都要在碱性条件下，醋酸中也可以做得上吗？...

略酸的环境下，只要FITC溶解了，一样可以结合上，只是测定时数值低。可以微调PH。最终测生物组织时用生理盐水，PH到7影响就不大了。
赞一下 回复此楼
9楼2012-07-19 05:03:20
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

奇幻之旅

木虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 气沉丹田 at 2012-07-19 05:03:20
略酸的环境下，只要FITC溶解了，一样可以结合上，只是测定时数值低。可以微调PH。最终测生物组织时用生理盐水，PH到7影响就不大了。...

谢谢噢~~
回复此楼
10楼2012-07-19 09:22:52
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 气沉丹田 的主题更新
111/2返回列表12下一页
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 5/250 2026-08-23 15:18 by KM5EcsNQRBPn
[公派出国] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 6/300 2026-08-23 14:45 by KM5EcsNQRBPn
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 8/400 2026-08-23 14:30 by KM5EcsNQRBPn
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +3 process2012 2026-08-23 4/200 2026-08-23 12:54 by huixian257
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办？ +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +15 羊腰板 2026-08-21 16/800 2026-08-23 10:45 by process2012
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 DpSrDtM079iu 2026-08-22 5/250 2026-08-23 04:07 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 5/250 2026-08-23 03:52 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 6/300 2026-08-23 03:40 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 QTy3jDtz1uLt 2026-08-21 9/450 2026-08-23 03:04 by OEbVnUOu01ol
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +7 且听虎啸 2026-08-17 8/400 2026-08-22 21:55 by 医学老男孩
[基金申请] filecode，4个jtjc了 +13 ziyangfang 2026-08-19 16/800 2026-08-22 17:08 by WH3796
[基金申请] 今天基金会出结果吗？20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 今日不放榜？网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +16 医学老男孩 2026-08-20 20/1000 2026-08-21 21:13 by Ldrop2023
[基金申请] 科研孤儿太难了 +17 我4大白菜 2026-08-20 18/900 2026-08-21 20:57 by zhangev
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 时间戳变了，能看出什么问题？ +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 明天放榜？ +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭