24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
汕头大学海洋科学接受调剂
查看: 3314  |  回复: 10
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

气沉丹田

木虫 (小有名气)

[求助] 做壳聚糖的FITC标记,如何测FITC结合含量?

最大的问题是壳聚糖只能在酸性环境下溶解,大于7.4就沉淀出来。而FITC又必须在碱性环境下才有强荧光。用分光光度计粗略测量时候,结合了FITC的壳聚糖的A值很高,但是做FITC的标准曲线A值却很低(用1%醋酸和甲醇1:1混合试剂溶解),测得的样品含FITC量都比反应时加的FITC高,为什么呢?和糖结合了反而不容易淬灭了么?现在要去做荧光检测,会有不同吗?
回复此楼
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nanocyq

木虫 (著名写手)

楼主是怎么反应连接的   怎么去除未反应的FITC的
4楼2011-12-24 09:15:20
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

huquan0_0

捐助贵宾 (正式写手)

你考虑下有没有必要来定量,如果只是用来示踪,就没有必要那么认真。标记后也可以看到有没有进入细胞之内的。

如果像你说的那样是ph的原因导致的,你也可以尝试下罗丹明这样的染料,或者其他的对ph不敏感的染料。
海纳百川有容乃大;自强不息止于至善。
2楼2011-12-23 14:05:57
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

气沉丹田

木虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by huquan0_0 at 2011-12-23 14:05:57:
你考虑下有没有必要来定量,如果只是用来示踪,就没有必要那么认真。标记后也可以看到有没有进入细胞之内的。

如果像你说的那样是ph的原因导致的,你也可以尝试下罗丹明这样的染料,或者其他的对ph不敏感的染料。

定量还是有必要的,需要通过测定FITC含量计算壳聚糖含量。做荧光在很低的含量下好像还可以。但是稀释起来太麻烦了。
3楼2011-12-24 08:29:51
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

气沉丹田

木虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by nanocyq at 2011-12-24 09:15:20:
楼主是怎么反应连接的   怎么去除未反应的FITC的

直接混匀振荡反应24小时,碱沉淀,离心,70%乙醇溶液多次洗涤。结合的还是很明显。
5楼2011-12-25 23:22:29
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂 +9 小聂爱学习 2026-04-11 13/650 2026-04-14 19:18 by Art1977
[考研] 271求调剂 +29 2261744733 2026-04-11 29/1450 2026-04-14 16:48 by zhouxiaoyu
[考研] 化学070300 求调剂 +23 哈哈哈^_^ 2026-04-12 23/1150 2026-04-14 16:30 by zhouxiaoyu
[考研] 药学求调剂 +6 RussHu 2026-04-12 7/350 2026-04-14 15:16 by sxdj2
[考研] 调剂求收留 +32 果然有我 2026-04-10 33/1650 2026-04-14 08:49 by 木木mumu~
[考研] 0854调剂 +10 长弓傲 2026-04-11 11/550 2026-04-13 10:38 by wp06
[考研] 346分,工科0854求调剂,专硕 +6 moser233 2026-04-12 7/350 2026-04-12 22:11 by fqwang
[考研] 295分求调剂 +13 ?要上岸? 2026-04-10 13/650 2026-04-12 15:37 by laoshidan
[考研] 电气专硕320求调剂 +6 小麻子111 2026-04-10 6/300 2026-04-12 10:54 by lemon6009
[考研] 求调剂,一志愿材料科学与工程985,365分, +8 材化李可 2026-04-11 10/500 2026-04-12 08:42 by 852137818
[考研] 343求调剂 +9 王国帅 2026-04-10 9/450 2026-04-11 20:31 by dongdian1
[考研] 本人女孩 +7 吼吼, 2026-04-10 9/450 2026-04-11 14:45 by ACS Nano——
[考研] 296求调剂 +6 汪!?! 2026-04-09 6/300 2026-04-11 11:25 by zhq0425
[考研] 085410-273求调剂 +6 X1999 2026-04-10 6/300 2026-04-11 10:32 by Delta2012
[考研] 283求调剂,工科! +12 苏打水7777 2026-04-08 12/600 2026-04-11 10:28 by 逆水乘风
[考研] 22408 352分求调剂0854类 +4 努力的夏末 2026-04-09 4/200 2026-04-11 09:57 by zhq0425
[考研] 一志愿北理工298英一数二已上岸,感谢各位老师 +14 Reframe 2026-04-10 16/800 2026-04-10 23:07 by caotw2020
[考研] 314求调剂 +18 xhhdjdjsjks 2026-04-09 19/950 2026-04-10 18:53 by HPUCZ
[考研] 一志愿中南大学物理学,英一66,求调剂 +4 长烟旖旎 2026-04-08 5/250 2026-04-10 10:31 by 颖果儿
[考研] 江苏大学 工科调剂 捡漏 +3 Evan_Liu 2026-04-09 5/250 2026-04-10 10:22 by Evan_Liu
信息提示
请填处理意见