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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 综合其他 » 做壳聚糖的FITC标记，如何测FITC结合含量？
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气沉丹田

木虫 (小有名气)

[求助] 做壳聚糖的FITC标记，如何测FITC结合含量？

最大的问题是壳聚糖只能在酸性环境下溶解，大于7.4就沉淀出来。而FITC又必须在碱性环境下才有强荧光。用分光光度计粗略测量时候，结合了FITC的壳聚糖的A值很高，但是做FITC的标准曲线A值却很低（用1%醋酸和甲醇1:1混合试剂溶解），测得的样品含FITC量都比反应时加的FITC高，为什么呢？和糖结合了反而不容易淬灭了么？现在要去做荧光检测，会有不同吗？
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1楼 2011-12-23 10:12:26
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huquan0_0

捐助贵宾 (正式写手)
你考虑下有没有必要来定量，如果只是用来示踪，就没有必要那么认真。标记后也可以看到有没有进入细胞之内的。

如果像你说的那样是ph的原因导致的，你也可以尝试下罗丹明这样的染料，或者其他的对ph不敏感的染料。
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海纳百川有容乃大；自强不息止于至善。
2楼2011-12-23 14:05:57
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