24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 3337  |  回复: 10

气沉丹田

木虫 (小有名气)

[求助] 做壳聚糖的FITC标记,如何测FITC结合含量?

最大的问题是壳聚糖只能在酸性环境下溶解,大于7.4就沉淀出来。而FITC又必须在碱性环境下才有强荧光。用分光光度计粗略测量时候,结合了FITC的壳聚糖的A值很高,但是做FITC的标准曲线A值却很低(用1%醋酸和甲醇1:1混合试剂溶解),测得的样品含FITC量都比反应时加的FITC高,为什么呢?和糖结合了反而不容易淬灭了么?现在要去做荧光检测,会有不同吗?
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

new drug

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huquan0_0

捐助贵宾 (正式写手)

你考虑下有没有必要来定量,如果只是用来示踪,就没有必要那么认真。标记后也可以看到有没有进入细胞之内的。

如果像你说的那样是ph的原因导致的,你也可以尝试下罗丹明这样的染料,或者其他的对ph不敏感的染料。
海纳百川有容乃大;自强不息止于至善。
2楼2011-12-23 14:05:57
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

气沉丹田

木虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by huquan0_0 at 2011-12-23 14:05:57:
你考虑下有没有必要来定量,如果只是用来示踪,就没有必要那么认真。标记后也可以看到有没有进入细胞之内的。

如果像你说的那样是ph的原因导致的,你也可以尝试下罗丹明这样的染料,或者其他的对ph不敏感的染料。

定量还是有必要的,需要通过测定FITC含量计算壳聚糖含量。做荧光在很低的含量下好像还可以。但是稀释起来太麻烦了。
3楼2011-12-24 08:29:51
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nanocyq

木虫 (著名写手)

楼主是怎么反应连接的   怎么去除未反应的FITC的
4楼2011-12-24 09:15:20
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

气沉丹田

木虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by nanocyq at 2011-12-24 09:15:20:
楼主是怎么反应连接的   怎么去除未反应的FITC的

直接混匀振荡反应24小时,碱沉淀,离心,70%乙醇溶液多次洗涤。结合的还是很明显。
5楼2011-12-25 23:22:29
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

奇幻之旅

木虫 (小有名气)


mwyuer: 金币+1, 欢迎常来生物材料版 2012-07-16 08:06:46
楼主还会回复么,壳聚糖不好溶,你是用什么做溶剂反应24小时的,是1%醋酸和水吗,会对原料有影响吗?
6楼2012-07-15 23:06:40
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

气沉丹田

木虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 奇幻之旅 at 2012-07-15 23:06:40
楼主还会回复么,壳聚糖不好溶,你是用什么做溶剂反应24小时的,是1%醋酸和水吗,会对原料有影响吗?

用醋酸稀溶液,0.6%,1%都用过。最后还是用的0.6%的。你意思是对什么原料?做药物的时候,对药物结合什么的没什么影响。
7楼2012-07-16 06:42:51
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

奇幻之旅

木虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 气沉丹田 at 2012-07-16 06:42:51
用醋酸稀溶液,0.6%,1%都用过。最后还是用的0.6%的。你意思是对什么原料?做药物的时候,对药物结合什么的没什么影响。...

先谢下楼主,我看好多做FITC都要在碱性条件下,醋酸中也可以做得上吗?
8楼2012-07-18 09:50:38
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

气沉丹田

木虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 奇幻之旅 at 2012-07-18 09:50:38
先谢下楼主,我看好多做FITC都要在碱性条件下,醋酸中也可以做得上吗?...

略酸的环境下,只要FITC溶解了,一样可以结合上,只是测定时数值低。可以微调PH。最终测生物组织时用生理盐水,PH到7影响就不大了。
9楼2012-07-19 05:03:20
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

奇幻之旅

木虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 气沉丹田 at 2012-07-19 05:03:20
略酸的环境下,只要FITC溶解了,一样可以结合上,只是测定时数值低。可以微调PH。最终测生物组织时用生理盐水,PH到7影响就不大了。...

谢谢噢~~
10楼2012-07-19 09:22:52
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 气沉丹田 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求计算机方向调剂 +3 Toffee2 2026-04-16 6/300 2026-04-19 22:37 by ll叶
[考研] 通信工程求调剂!!! +7 zlb770521 2026-04-14 7/350 2026-04-19 20:56 by Equinoxhua
[考研] 297,工科调剂? +11 河南农业大学-能 2026-04-14 11/550 2026-04-19 20:07 by Equinoxhua
[考研] 289 分105500药学专硕求调剂(找B区学校) +5 白云123456789 2026-04-13 5/250 2026-04-19 18:12 by Equinoxhua
[考研] 291求调剂 +11 关忆北. 2026-04-14 11/550 2026-04-19 17:16 by 中豫男
[考研] 304求调剂 +8 castLight 2026-04-16 8/400 2026-04-19 17:14 by 中豫男
[考研] 求调剂 +6 苦命人。。。 2026-04-18 7/350 2026-04-19 16:27 by 中豫男
[考研] 0854求调剂 +23 门路摸摸 2026-04-15 27/1350 2026-04-19 01:59 by 烟雨流涯
[考研] 一志愿沪9,326求生物学调剂 +12 刘墨墨 2026-04-13 12/600 2026-04-18 23:31 by 路病情
[考研] 320求调剂 +5 深郊akm 2026-04-17 5/250 2026-04-18 19:52 by 王珺璞
[考研] 收到复试调剂但是去不了 +8 小蜗牛* 2026-04-16 8/400 2026-04-18 11:15 by zixin2025
[有机交流] 二苯甲酮酸类衍生物 50+3 小白爱主人 2026-04-17 6/300 2026-04-17 18:47 by kf2781974
[考研] 322求调剂 +6 tekuzu 2026-04-17 6/300 2026-04-17 13:48 by Espannnnnol
[考研] 一志愿沪9,生物学326求调剂 +9 刘墨墨 2026-04-15 9/450 2026-04-16 17:14 by 崔崔崔cccc
[考研] 297,工科调剂?河南农业大学本科 +14 河南农业大学-能 2026-04-14 14/700 2026-04-16 14:41 by dingyanbo1
[基金申请] RY:中国产出的科学垃圾论文,绝对数量和比例都世界第一 +7 zju2000 2026-04-14 18/900 2026-04-16 11:36 by 欢乐颂叶蓁
[考研] 297工科调剂? +14 河南农业大学-能 2026-04-13 15/750 2026-04-15 13:25 by 黑科技矿业
[考研] 各位老师好,求调剂,本科211,一志愿天津大学生物与医药学硕,差两名录取。 +11 路六六jjj 2026-04-13 11/550 2026-04-14 16:01 by zs92450
[考研] 考研调剂 +13 长弓傲 2026-04-13 14/700 2026-04-14 14:44 by zs92450
[考研] 085408光电信息工程专硕355一志愿长春光机所调剂 +6 王ymaa 2026-04-13 13/650 2026-04-14 11:33 by 王ymaa
信息提示
请填处理意见