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zhangbo1987

新虫 (正式写手)

[求助] 组织切片免疫荧光

请教各位,组织切片的免疫荧光染色,先将兔抗鼠的多克隆抗体孵育好,继续染蓝光标记的抗兔的二抗,这是第一部分,然后再染一次红光标记的兔抗鼠的多克隆抗体,这是第二部分,这样可以吗?第二部分的兔抗还会和第一部分的二抗结合吗?买抗体的时候没想好,两个一抗不能同时先孵育了。谢谢
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diandong

禁虫 (著名写手)

本帖内容被屏蔽

2楼2012-10-28 17:00:37
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zhangbo1987

新虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by diandong at 2012-10-28 17:00:37
可以分开来做,用相同的一抗,不同的二抗,最后整合从一张图对照着来看。

我没太明白您的意思,我的第一部分是染血管,用了兔抗鼠Cd31的一抗,接着用蓝光标记的兔二抗,第二部分是染一个受体,用的是红光标记的兔抗鼠的抗体,关键是两部分都是兔抗鼠,所以必须分开来做。这样会有影响吗?对已经完成染色的第一部分,谢谢哈
3楼2012-10-28 20:10:11
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zhangbo1987

新虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by diandong at 2012-10-28 17:00:37
可以分开来做,用相同的一抗,不同的二抗,最后整合从一张图对照着来看。

我的抗体已经买好了,没办法了,可以这样做吗
4楼2012-10-28 20:11:08
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dayancao

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by zhangbo1987 at 2012-10-28 20:10:11
我没太明白您的意思,我的第一部分是染血管,用了兔抗鼠Cd31的一抗,接着用蓝光标记的兔二抗,第二部分是染一个受体,用的是红光标记的兔抗鼠的抗体,关键是两部分都是兔抗鼠,所以必须分开来做。这样会有影响吗? ...

可以,建议先染红光,后续所有的惭操作都要避光,然后加下一个抗体,然蓝光,最后核染。都是兔抗鼠,一般不会有影响,因为一抗和二抗结合的特异性很强的,第二个二抗不会结合到第一个一炕上的!
5楼2013-04-21 09:56:59
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Senlones

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by zhangbo1987 at 2012-10-28 20:10:11
我没太明白您的意思,我的第一部分是染血管,用了兔抗鼠Cd31的一抗,接着用蓝光标记的兔二抗,第二部分是染一个受体,用的是红光标记的兔抗鼠的抗体,关键是两部分都是兔抗鼠,所以必须分开来做。这样会有影响吗? ...

你好,能把你的具体方法发给我吗?谢谢了
6楼2014-09-24 17:35:50
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夏雨萱飞

新虫 (初入文坛)

他们有这样做过的 貌似结果还行
7楼2016-07-23 22:57:22
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