24小时热门版块排行榜    

查看: 1618  |  回复: 7

小郭童鞋

铁虫 (正式写手)

[求助] 免疫荧光效果不好 已有3人参与

菜鸟一枚,免疫荧光做不出来,本身抗体特异性也不好,但是请问有什么优化的条件么?比如,延长封闭、一抗孵育时间什么的?感激不尽。。。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
如果做WB特异性都不好的抗体就不要指望做IF了
2楼2014-05-16 15:55:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小郭童鞋

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2014-05-16 15:55:24
如果做WB特异性都不好的抗体就不要指望做IF了

增强液的话可以做WB,就是IF之后要曝光将近4秒才有信号,所以这信号就没有说服力了,有可能已经过曝
3楼2014-05-17 10:15:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

junboliang

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1. 做IF对抗体要求很高,所以尽可能找能做IF的抗体。
2. 做IF要设好阴性对照和阳性对照,阴性对照以排除抗体的非特异性结合,阳性对照可以帮你排除实验过程可能出现的问题。
3. IF的结果最好用共聚焦显微镜拍照。
4楼2014-05-17 10:41:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huiting410

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
细胞状态也是重要的环节
5楼2014-05-17 10:46:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 小郭童鞋 at 2014-05-17 10:15:37
增强液的话可以做WB,就是IF之后要曝光将近4秒才有信号,所以这信号就没有说服力了,有可能已经过曝...

看来你的目的蛋白量很少,需要特异性很好的抗体
6楼2014-05-17 11:06:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小郭童鞋

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by junboliang at 2014-05-17 10:41:56
1. 做IF对抗体要求很高,所以尽可能找能做IF的抗体。
2. 做IF要设好阴性对照和阳性对照,阴性对照以排除抗体的非特异性结合,阳性对照可以帮你排除实验过程可能出现的问题。
3. IF的结果最好用共聚焦显微镜拍照。

抗体应该是有点问题   阴性对照和阳性相同曝光时间也出现信号了    应该是过曝了
7楼2014-05-17 11:27:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小郭童鞋

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by huiting410 at 2014-05-17 10:46:11
细胞状态也是重要的环节

细胞是现抽现用的血细胞   目的蛋白量比较少吧应该
8楼2014-05-17 11:28:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 小郭童鞋 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 282求调剂 +4 2103240126 2026-03-02 5/250 2026-03-02 13:45 by littlehu66
[考研] 0805总分292,求调剂 +8 幻想之殇 2026-03-01 8/400 2026-03-02 12:51 by 无际的草原
[考研] 0856调剂 +6 刘梦微 2026-02-28 6/300 2026-03-02 12:44 by 无际的草原
[考研] 哈工大计算机刘劼团队招生 +4 hit_aiot 2026-03-01 6/300 2026-03-02 11:53 by 一声问好
[考研] 274求调剂 +3 cgyzqwn 2026-03-01 7/350 2026-03-02 10:38 by lature00
[考研] 275求调剂 +3 L-xin? 2026-03-01 6/300 2026-03-02 10:22 by 热情沙漠
[考研] 调剂 +3 13853210211 2026-03-02 4/200 2026-03-02 10:16 by 13853210211
[考研] 材料学调剂 +10 提神豆沙包 2026-02-28 12/600 2026-03-02 09:26 by 李老师!
[考研] 材料类求调剂 +11 wana_kiko 2026-02-28 14/700 2026-03-02 08:46 by 聪明的大松鼠
[考研] 材料复试调剂 +4 学材料的点 2026-03-01 5/250 2026-03-02 08:26 by houyaoxu
[基金申请] 成果系统访问量大,请一小时后再尝试。---NSFC啥时候好哦,已经两天这样了 +4 NSFC2026我来了 2026-02-28 4/200 2026-03-01 22:37 by 铁门栓
[考研] 306分材料调剂 +4 chuanzhu川烛 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:48 by 无际的草原
[考博] 26申博 +4 想申博! 2026-02-26 6/300 2026-03-01 17:32 by 想申博!
[考研] 328求调剂 +3 aaadim 2026-03-01 5/250 2026-03-01 17:29 by njzyff
[基金申请] 刚录用,没有期刊号,但是在线可看的论文可以放为代表作吗 10+3 arang1 2026-03-01 3/150 2026-03-01 16:43 by babero
[考研] 313求调剂 +3 水流年lc 2026-02-28 3/150 2026-03-01 16:01 by 新能源达人
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-02-28 7/350 2026-03-01 15:14 by wjLi2017
[考研] 课题组接收材料类调剂研究生 +3 gaoxiaoniuma 2026-02-28 4/200 2026-03-01 14:30 by jjj三跨
[考研] 调剂 +3 简木ChuFront 2026-02-28 3/150 2026-03-01 11:46 by 王伟要上岸啊
[考研] 085600材料工程一志愿中科大总分312求调剂 +8 吃宵夜1 2026-02-28 10/500 2026-02-28 20:27 by L135790
信息提示
请填处理意见