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[交流]
【求助/交流】冰冻切片免疫荧光观察肿瘤血管
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各位朋友大家好，我想对肿瘤血管进行免疫荧光观察。过程：先进行心脏灌注以免血液影响；4%多聚甲醛固定；切片；观察。也有灌注完之后直接冰冻切片，是不是有冰晶干扰观察？固定怎么办？ 我都糊涂了，不知道该怎么办？请教明白人，谢谢。 |
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wah235(金币+2): 谢谢，很详细 2011-04-16 16:51:40
dhd997(金币+6, EPI+1): good 2011-04-17 14:26:15
wah235(金币+2): 谢谢，很详细 2011-04-16 16:51:40
dhd997(金币+6, EPI+1): good 2011-04-17 14:26:15
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是的 冰冻切片有人就是灌注完了就直接切片的 但是要求时间要抓紧的 就是灌注完了立刻切片 这种方法就是抗原保护得特别好 但是容易被酶降解 所以要求切片速度 还要求切片手法要好 因为没固定脱水的组织特别软 比较难切的 但是不用考虑冰晶的 因为冰晶是在-40度才大量产生 而冰冻切片一般是在-20至-25度完成的 但是要是灌注后固定在切片的话 就是可以让组织充分固定 抗原蛋白可以长期存在 可以报组织保存在-20至-80度 慢慢切片至最好效果 然后染色 |
2楼2011-04-16 10:58:39
3楼2011-04-16 16:54:58
4楼2011-04-17 09:57:58
5楼2011-04-17 17:17:14
6楼2011-04-18 11:16:31
7楼2011-04-18 15:51:49