应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 免疫实验 » 免疫荧光效果不好
81/1返回列表
查看: 1829  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

小郭童鞋

铁虫 (正式写手)

[求助] 免疫荧光效果不好 已有3人参与

菜鸟一枚，免疫荧光做不出来，本身抗体特异性也不好，但是请问有什么优化的条件么？比如，延长封闭、一抗孵育时间什么的？感激不尽。。。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-05-16 15:12:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
如果做WB特异性都不好的抗体就不要指望做IF了
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2014-05-16 15:55:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小郭童鞋

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2014-05-16 15:55:24
如果做WB特异性都不好的抗体就不要指望做IF了

增强液的话可以做WB，就是IF之后要曝光将近4秒才有信号，所以这信号就没有说服力了，有可能已经过曝
赞一下 回复此楼
3楼2014-05-17 10:15:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

junboliang

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1. 做IF对抗体要求很高，所以尽可能找能做IF的抗体。
2. 做IF要设好阴性对照和阳性对照，阴性对照以排除抗体的非特异性结合，阳性对照可以帮你排除实验过程可能出现的问题。
3. IF的结果最好用共聚焦显微镜拍照。
赞一下 回复此楼
4楼2014-05-17 10:41:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huiting410

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
细胞状态也是重要的环节
赞一下 回复此楼
5楼2014-05-17 10:46:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 小郭童鞋 at 2014-05-17 10:15:37
增强液的话可以做WB，就是IF之后要曝光将近4秒才有信号，所以这信号就没有说服力了，有可能已经过曝...

看来你的目的蛋白量很少，需要特异性很好的抗体
赞一下 回复此楼
6楼2014-05-17 11:06:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小郭童鞋

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by junboliang at 2014-05-17 10:41:56
1. 做IF对抗体要求很高，所以尽可能找能做IF的抗体。
2. 做IF要设好阴性对照和阳性对照，阴性对照以排除抗体的非特异性结合，阳性对照可以帮你排除实验过程可能出现的问题。
3. IF的结果最好用共聚焦显微镜拍照。

抗体应该是有点问题   阴性对照和阳性相同曝光时间也出现信号了    应该是过曝了
赞一下 回复此楼
7楼2014-05-17 11:27:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小郭童鞋

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by huiting410 at 2014-05-17 10:46:11
细胞状态也是重要的环节

细胞是现抽现用的血细胞   目的蛋白量比较少吧应该
赞一下 回复此楼
8楼2014-05-17 11:28:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 小郭童鞋 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 找导师 +4 yuanjiabao 2026-08-29 5/250 2026-08-30 09:52 by onesupeng
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上） +6 gdd2018 2026-08-28 11/550 2026-08-30 08:58 by 超级无敌华子
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 5/250 2026-08-30 08:33 by ZPa0EcMwuECS
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 4/200 2026-08-30 07:39 by ZPa0EcMwuECS
[博后之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 7/350 2026-08-30 06:35 by ZPa0EcMwuECS
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 6/300 2026-08-30 06:22 by ZPa0EcMwuECS
[找工作] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 8/400 2026-08-30 06:13 by ZPa0EcMwuECS
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +6 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 10/500 2026-08-30 06:11 by ZPa0EcMwuECS
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 8/400 2026-08-30 06:02 by ZPa0EcMwuECS
[教师之家] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 8/400 2026-08-30 05:48 by ZPa0EcMwuECS
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +7 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 11/550 2026-08-30 05:40 by ZPa0EcMwuECS
[考博] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 4/200 2026-08-30 01:34 by ZPa0EcMwuECS
[公派出国] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 7/350 2026-08-30 01:12 by ZPa0EcMwuECS
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件，有关系吗？ +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +23 koalala 2026-08-24 26/1300 2026-08-26 14:29 by 宝贝虫子
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候，我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 明天应该可查了！？ +6 chengyan1220 2026-08-23 6/300 2026-08-25 19:45 by zfd97
[基金申请] 某些机构，以效率低为荣，以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭