应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 免疫实验 » 免疫荧光效果不好
81/1返回列表
查看: 1652  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

小郭童鞋

铁虫 (正式写手)

[求助] 免疫荧光效果不好 已有3人参与

菜鸟一枚，免疫荧光做不出来，本身抗体特异性也不好，但是请问有什么优化的条件么？比如，延长封闭、一抗孵育时间什么的？感激不尽。。。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-05-16 15:12:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
如果做WB特异性都不好的抗体就不要指望做IF了
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2014-05-16 15:55:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小郭童鞋

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2014-05-16 15:55:24
如果做WB特异性都不好的抗体就不要指望做IF了

增强液的话可以做WB，就是IF之后要曝光将近4秒才有信号，所以这信号就没有说服力了，有可能已经过曝
赞一下 回复此楼
3楼2014-05-17 10:15:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

junboliang

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1. 做IF对抗体要求很高，所以尽可能找能做IF的抗体。
2. 做IF要设好阴性对照和阳性对照，阴性对照以排除抗体的非特异性结合，阳性对照可以帮你排除实验过程可能出现的问题。
3. IF的结果最好用共聚焦显微镜拍照。
赞一下 回复此楼
4楼2014-05-17 10:41:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huiting410

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
细胞状态也是重要的环节
赞一下 回复此楼
5楼2014-05-17 10:46:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 小郭童鞋 at 2014-05-17 10:15:37
增强液的话可以做WB，就是IF之后要曝光将近4秒才有信号，所以这信号就没有说服力了，有可能已经过曝...

看来你的目的蛋白量很少，需要特异性很好的抗体
赞一下 回复此楼
6楼2014-05-17 11:06:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小郭童鞋

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by junboliang at 2014-05-17 10:41:56
1. 做IF对抗体要求很高，所以尽可能找能做IF的抗体。
2. 做IF要设好阴性对照和阳性对照，阴性对照以排除抗体的非特异性结合，阳性对照可以帮你排除实验过程可能出现的问题。
3. IF的结果最好用共聚焦显微镜拍照。

抗体应该是有点问题   阴性对照和阳性相同曝光时间也出现信号了    应该是过曝了
赞一下 回复此楼
7楼2014-05-17 11:27:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小郭童鞋

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by huiting410 at 2014-05-17 10:46:11
细胞状态也是重要的环节

细胞是现抽现用的血细胞   目的蛋白量比较少吧应该
赞一下 回复此楼
8楼2014-05-17 11:28:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 小郭童鞋 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 化工学硕294分，求导师收留 +33 yzyzx 2026-04-12 37/1850 2026-04-17 23:00 by wunaiy88
[考研] 22专硕求调剂 +10 haoyun上岸 2026-04-11 12/600 2026-04-16 22:21 by 猪会飞
[考研] 材料相关专业344求调剂双非工科学校或课题组 +23 hualkop 2026-04-12 25/1250 2026-04-16 22:12 by SUSE_CL
[考研] 22408 312求调剂 +23 门路摸摸 2026-04-14 25/1250 2026-04-16 21:21 by Art1977
[考研] 291求调剂 +11 关忆北. 2026-04-14 11/550 2026-04-16 15:18 by jiahl2024
[考研] 0854调剂 +13 长弓傲 2026-04-12 16/800 2026-04-15 13:45 by fenglj492
[考研] 085801电气专硕272求调剂 +19 电气李 2026-04-13 21/1050 2026-04-15 13:37 by 黑科技矿业
[考研] 调剂 +12 月@163.com 2026-04-11 12/600 2026-04-14 15:37 by zs92450
[考研] 求调剂 +12 何气正 2026-04-13 13/650 2026-04-14 14:47 by zs92450
[考研] 考研求调剂 +6 ban班小七 2026-04-11 6/300 2026-04-14 14:06 by 哆啦A梦只是个梦
[考研] 085408光电信息工程专硕355一志愿长春光机所调剂 +6 王ymaa 2026-04-13 13/650 2026-04-14 11:33 by 王ymaa
[考研] 085600材料与化工329分求调剂 +24 叶zilin 2026-04-13 25/1250 2026-04-14 09:20 by 试管破裂
[考研] 305求调剂 +8 玛卡巴卡boom 2026-04-11 8/400 2026-04-14 09:04 by pengliang8036
[考研] 2026硕士调剂_能动_河南农业大学 +4 河南农业大学-能 2026-04-12 4/200 2026-04-13 22:01 by bljnqdcc
[考研] 一志愿中南大学 0855 机械 286 求调剂 +11 不会吃肉 2026-04-12 11/550 2026-04-13 21:59 by bljnqdcc
[考研] 290求调剂 +18 柯淮然 2026-04-12 20/1000 2026-04-13 12:56 by cyh—315
[考研] 。 +10 李多米lee. 2026-04-12 11/550 2026-04-12 22:58 by yuyin1233
[考研] 调剂结束 +6 floriea 2026-04-12 8/400 2026-04-12 18:13 by zhouxiaoyu
[考研] 求调剂，一志愿材料科学与工程985，365分， +8 材化李可 2026-04-11 10/500 2026-04-12 08:42 by 852137818
[考研] 调剂求助 +6 果然有我 2026-04-11 7/350 2026-04-11 16:22 by 明月此时有
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭