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zhangbo1987

新虫 (正式写手)

[求助] 组织切片免疫荧光

请教各位，组织切片的免疫荧光染色，先将兔抗鼠的多克隆抗体孵育好，继续染蓝光标记的抗兔的二抗，这是第一部分，然后再染一次红光标记的兔抗鼠的多克隆抗体，这是第二部分，这样可以吗？第二部分的兔抗还会和第一部分的二抗结合吗？买抗体的时候没想好，两个一抗不能同时先孵育了。谢谢
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1楼 2012-10-28 12:01:30
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zhangbo1987

新虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by diandong at 2012-10-28 17:00:37
可以分开来做，用相同的一抗，不同的二抗，最后整合从一张图对照着来看。

我没太明白您的意思，我的第一部分是染血管，用了兔抗鼠Cd31的一抗，接着用蓝光标记的兔二抗，第二部分是染一个受体，用的是红光标记的兔抗鼠的抗体，关键是两部分都是兔抗鼠，所以必须分开来做。这样会有影响吗？对已经完成染色的第一部分，谢谢哈
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3楼2012-10-28 20:10:11
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diandong

禁虫 (著名写手)
本帖内容被屏蔽
2楼2012-10-28 17:00:37
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zhangbo1987

新虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by diandong at 2012-10-28 17:00:37
可以分开来做，用相同的一抗，不同的二抗，最后整合从一张图对照着来看。

我的抗体已经买好了，没办法了，可以这样做吗
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4楼2012-10-28 20:11:08
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dayancao

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by zhangbo1987 at 2012-10-28 20:10:11
我没太明白您的意思，我的第一部分是染血管，用了兔抗鼠Cd31的一抗，接着用蓝光标记的兔二抗，第二部分是染一个受体，用的是红光标记的兔抗鼠的抗体，关键是两部分都是兔抗鼠，所以必须分开来做。这样会有影响吗？ ...

可以，建议先染红光，后续所有的惭操作都要避光，然后加下一个抗体，然蓝光，最后核染。都是兔抗鼠，一般不会有影响，因为一抗和二抗结合的特异性很强的，第二个二抗不会结合到第一个一炕上的！
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5楼2013-04-21 09:56:59
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