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组织切片免疫荧光
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zhangbo1987
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组织切片免疫荧光
请教各位,组织切片的免疫荧光染色,先将兔抗鼠的多克隆抗体孵育好,继续染蓝光标记的抗兔的二抗,这是第一部分,然后再染一次红光标记的兔抗鼠的多克隆抗体,这是第二部分,这样可以吗?第二部分的兔抗还会和第一部分的二抗结合吗?买抗体的时候没想好,两个一抗不能同时先孵育了。谢谢
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1楼
2012-10-28 12:01:30
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dayancao
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zhangbo1987
at 2012-10-28 20:10:11
我没太明白您的意思,我的第一部分是染血管,用了兔抗鼠Cd31的一抗,接着用蓝光标记的兔二抗,第二部分是染一个受体,用的是红光标记的兔抗鼠的抗体,关键是两部分都是兔抗鼠,所以必须分开来做。这样会有影响吗? ...
可以,建议先染红光,后续所有的惭操作都要避光,然后加下一个抗体,然蓝光,最后核染。都是兔抗鼠,一般不会有影响,因为一抗和二抗结合的特异性很强的,第二个二抗不会结合到第一个一炕上的!
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5楼
2013-04-21 09:56:59
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diandong
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2楼
2012-10-28 17:00:37
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zhangbo1987
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2楼
:
Originally posted by
diandong
at 2012-10-28 17:00:37
可以分开来做,用相同的一抗,不同的二抗,最后整合从一张图对照着来看。
我没太明白您的意思,我的第一部分是染血管,用了兔抗鼠Cd31的一抗,接着用蓝光标记的兔二抗,第二部分是染一个受体,用的是红光标记的兔抗鼠的抗体,关键是两部分都是兔抗鼠,所以必须分开来做。这样会有影响吗?对已经完成染色的第一部分,谢谢哈
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3楼
2012-10-28 20:10:11
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zhangbo1987
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2楼
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diandong
at 2012-10-28 17:00:37
可以分开来做,用相同的一抗,不同的二抗,最后整合从一张图对照着来看。
我的抗体已经买好了,没办法了,可以这样做吗
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4楼
2012-10-28 20:11:08
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