应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】DGGE遇到了难题，向大家求助！
51/1返回列表
查看: 2050  |  回复: 10
查看全部回帖@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

mars20081587

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】DGGE遇到了难题，向大家求助！已有6人参与

最近在做水体里细菌的V3区DGGE，引物是341f-GC和907r（参考国内外文献），我把同一个DNA模板用了不同的PCR方法跑琼脂糖电泳胶，求得最好的方法，然后用这些PCR产物跑DGGE胶，40%-64%，6%胶，明明PCR条带很亮，可是DGGE的条带却都不清晰，请教各位高手，希望能得到解答，第一张图片是PCR的图，第二张是DGGE的图。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼2010-12-13 20:23:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tsq0126

金虫 (小有名气)

求助

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by mars20081587 at 2010-12-13 20:23:22:
最近在做水体里细菌的V3区DGGE，引物是341f-GC和907r（参考国内外文献），我把同一个DNA模板用了不同的PCR方法跑琼脂糖电泳胶，求得最好的方法，然后用这些PCR产物跑DGGE胶，40%-64%，6%胶，明明PCR条带很亮，可是 ...

同学，你的问题解决了吗？我现在和你面临一样的问题，帮帮忙。
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2011-01-06 14:44:29
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tsq0126

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by tsq0126 at 2011-01-06 14:44:29:




同学，你的问题解决了吗？我现在和你面临一样的问题，帮帮忙。



这两个图是我的V3片段的PCR产物和DGGE的结果，同学相信你的问题已经解决了吧，我现在也遇到瓶颈啦，希望得到你的帮助。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-01-06 14:54:23
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tsq0126

金虫 (小有名气)

急急急急急急

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by xiadongliang at 2011-01-07 14:48:02:



什么染色方法啊？EB还是银染？

我用的是稀释一万倍的SYBR Green I，避光染色三十分钟的效果。
现在就是不知道哪个环节出现问题啦，我就是按照以前有个学姐的方法来做的。她的图就很好，不过她现在毕业啦，好多细节的东西不太清楚。各位大虾帮帮忙。
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2011-01-08 09:20:35
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tsq0126

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 在雨中 at 2011-01-08 10:28:46:
我一般使用338F 518R的引物做DGGE。341F和907R引物扩增的片段太长，不容易分离，得不出好图。
我觉得你们的胶有问题。

做胶的各种试剂是从上海生工买的，很多人建议用SIGMA的，不过我们做的不多，买进口的太贵了，就买了国产的了。
制胶过程有什么需要特别注意的地方吗？
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2011-01-08 14:06:02
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 mars20081587 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复(可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭