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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】这种PCR结果是为什么
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wangy0908

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】这种PCR结果是为什么

这段时间做的pcr,在1%的gel电泳。重复了几次都是密散的。
是做的Inverse PCR, 酶切后自连接，自连接的DNA用量是10ng，50ul体系。取2ul做第一次pcr， 第一次PCR产物稀释200倍，取2ul做第二次pcr。图片就是第二次pcr产物。第一次的pcr产物电泳没有任何结果。
请教各位高人指点指点！！
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1楼2010-11-11 03:16:59
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bigboy123

铜虫 (小有名气)
★
wangy0908(金币+2): 2010-11-12 22:05:09
dhd997(金币+1):鼓励交流 2010-11-14 08:40:18
两次PCR不要用相同的引物，否则一般经常会弥散的。
最后一步把延伸时间延长点。
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12楼2010-11-12 10:03:20
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randomqd

木虫 (小有名气)

有可能是loading

wangy0908(金币+1): 2010-11-11 19:57:37
看一下上样buf有没有问题。。。
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2楼2010-11-11 08:31:35
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magy2006

木虫 (著名写手)
wangy0908(金币+1): 2010-11-11 19:43:40
模板浓度极高外加循环数极多
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3楼2010-11-11 08:37:36
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aaron2012

银虫 (初入文坛)
下次建议时间跑长点  你看Marker都没有完全分开
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4楼2010-11-11 09:33:23
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