24小时热门版块排行榜    

查看: 1590  |  回复: 3
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

Violet2118

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】新引物PCR就是没结果,正负对照都正常,请问可能是什么原因呢?

最近刚定的引物,温度有的略高58度。片段略大,3.2和3.5kb。但是已经做了梯度PCR,延伸温度50,55到65都试过了,电泳什么也没有。但正对照是有条带的,负对照也很干净。正在检查是不是引物问题,我想问问还有别的什么可能?如果是引物问题可能是什么原因?引物序列已经比对了,应该没问题的啊。奇怪了。。。
这个实验刚开始做,就遇到这种问题,很郁闷啊。。。麻烦大家集思广益帮帮忙!谢谢!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jackiechubut

木虫 (小有名气)

你是用什么作为模板的?要是cDNA的话可以试试用long chain PCR试试
一笑寂寥空万古,三分明月照大江
4楼2010-11-08 10:37:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答

475502411

铜虫 (著名写手)

是不是模板的问题啊,时间太长可能降解,可以试试提下新模板,应该不是引物或程序的问题,因为你的阳性有结果啊
可以朝九晚五,也能浪迹天涯
2楼2010-11-05 21:52:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bigboy123

铜虫 (小有名气)

刚开始一般都是样本的问题,样本中核酸低或者干脆就没有靶基因。引物只要差不多点,好歹都会给点带的。
供应PCR增量剂
3楼2010-11-07 09:32:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +16 Lanmanbaby 2026-08-09 25/1250 2026-08-11 15:51 by 医学老男孩
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +7 Tide man 2026-08-10 8/400 2026-08-11 15:49 by 铁帽子农民
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 6/300 2026-08-11 13:19 by JACS/Angew
[基金申请] 帮忙看看fileCode +6 wwncly 2026-08-10 12/600 2026-08-11 13:01 by wwncly
[基金申请] filecode +9 documentary 2026-08-10 9/450 2026-08-11 10:08 by wk7465
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +8 家与远方 2026-08-10 13/650 2026-08-11 09:49 by 家与远方
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 静等基金结果 +5 gjjjzhong 2026-08-10 16/800 2026-08-10 17:19 by Tide man
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 好奇怪的filecode +4 布布和一二 2026-08-08 5/250 2026-08-10 14:20 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 大家散了吧,后缀研究没有意义,别浪费时间了,过好目前的每一天,不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
信息提示
请填处理意见