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Violet2118

金虫 (小有名气)

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专业: 植物遗传学

[交流] 【求助/交流】新引物PCR就是没结果，正负对照都正常，请问可能是什么原因呢？

最近刚定的引物，温度有的略高58度。片段略大，3.2和3.5kb。但是已经做了梯度PCR，延伸温度50，55到65都试过了，电泳什么也没有。但正对照是有条带的，负对照也很干净。正在检查是不是引物问题，我想问问还有别的什么可能？如果是引物问题可能是什么原因？引物序列已经比对了，应该没问题的啊。奇怪了。。。
这个实验刚开始做，就遇到这种问题，很郁闷啊。。。麻烦大家集思广益帮帮忙！谢谢！

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1楼2010-11-04 22:53:04

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475502411

铜虫 (著名写手)

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是不是模板的问题啊，时间太长可能降解，可以试试提下新模板，应该不是引物或程序的问题，因为你的阳性有结果啊

可以朝九晚五，也能浪迹天涯

2楼2010-11-05 21:52:57

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