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Violet2118

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】新引物PCR就是没结果,正负对照都正常,请问可能是什么原因呢?

最近刚定的引物,温度有的略高58度。片段略大,3.2和3.5kb。但是已经做了梯度PCR,延伸温度50,55到65都试过了,电泳什么也没有。但正对照是有条带的,负对照也很干净。正在检查是不是引物问题,我想问问还有别的什么可能?如果是引物问题可能是什么原因?引物序列已经比对了,应该没问题的啊。奇怪了。。。
这个实验刚开始做,就遇到这种问题,很郁闷啊。。。麻烦大家集思广益帮帮忙!谢谢!
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jackiechubut

木虫 (小有名气)

你是用什么作为模板的?要是cDNA的话可以试试用long chain PCR试试
一笑寂寥空万古,三分明月照大江
4楼2010-11-08 10:37:06
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