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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】请教关于pPIC9K EcoRI 单酶切
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dhmdddd

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】请教关于pPIC9K EcoRI 单酶切

用EcoRI单酶切pPIC9K质粒，我还专门在NCBI上面查了这个质粒的序列，分析后上面就有一个EcoRI酶切位点，但是单酶切后总是出现两条带，之前怀疑是质粒不对，可是新换的质粒酶切后还是两条带，很是郁闷！我的体系：质粒4.5µ，dd水4µ，10*buffer1µ，酶0.5µ,还能是什么原因没有想到呢？请教各位，先谢过了！
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上班族，学习ing……
1楼 2010-11-02 16:19:32
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空谷幽风

金虫 (正式写手)
dhmdddd(金币+1):质粒原来的大小事对的，就是单切后不对，多出来四千多~ 2010-11-04 12:44:13
换其他的单酶切位点的酶切一下看载体大小对不，我怀疑你的载体不是原始载体而是被改造过
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a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
2楼2010-11-03 14:44:17
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raynancy1943

新虫 (初入文坛)
dhmdddd(金币+1):质粒加起来不是要比总的要大，就是多出来一段四千多的吧 2010-11-04 12:43:31
载体可能被改造过，两个片段大小加起来是不是和载体一样大？可以换两外一个单位点的酶切一下，还可以将质粒测序，这样最准确，就是费时费钱
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3楼2010-11-03 14:48:53
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huaren125

禁虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
dhmdddd(金币+1): 谢谢~ 2011-07-17 18:53:53
本帖内容被屏蔽
4楼2011-07-17 18:18:04
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