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dhmdddd

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】请教关于pPIC9K EcoRI 单酶切

用EcoRI单酶切pPIC9K质粒,我还专门在NCBI上面查了这个质粒的序列,分析后上面就有一个EcoRI酶切位点,但是单酶切后总是出现两条带,之前怀疑是质粒不对,可是新换的质粒酶切后还是两条带,很是郁闷!我的体系:质粒4.5µ,dd水4µ,10*buffer1µ,酶0.5µ,还能是什么原因没有想到呢?请教各位,先谢过了!
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空谷幽风

金虫 (正式写手)

dhmdddd(金币+1):质粒原来的大小事对的,就是单切后不对,多出来四千多~ 2010-11-04 12:44:13
换其他的单酶切位点的酶切一下看载体大小对不,我怀疑你的载体不是原始载体而是被改造过
a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
2楼2010-11-03 14:44:17
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raynancy1943

新虫 (初入文坛)

dhmdddd(金币+1):质粒加起来不是要比总的要大,就是多出来一段四千多的吧 2010-11-04 12:43:31
载体可能被改造过,两个片段大小加起来是不是和载体一样大?可以换两外一个单位点的酶切一下,还可以将质粒测序,这样最准确,就是费时费钱
3楼2010-11-03 14:48:53
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huaren125

禁虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
dhmdddd(金币+1): 谢谢~ 2011-07-17 18:53:53
本帖内容被屏蔽

4楼2011-07-17 18:18:04
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