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【求助/交流】重叠PCR相关问题。
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proteinwang
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[交流]
【求助/交流】重叠PCR相关问题。
已有8人参与
大家好,近短时间在做重叠PCR,本来打算进行三片段的重叠融合,引物设计时重叠区域30bpbp,但是一直没有做出来。
更换方案两片段融合后再将融合好的片段与第三个片段融合,电泳结果显示两片段融合后大小是正确的,但是以两片段融合好的基因片段为模板,融合时的引物进行PCR,扩不出东西来。
请有相关经验的高手指点!
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1楼
2010-10-15 15:20:34
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chlamy
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2012-05-25 13:42:02
引用回帖:
1154687楼
:
Originally posted by
proteinwang
at 2010-10-15 15:20:34:
大家好,近短时间在做重叠PCR,本来打算进行三片段的重叠融合,引物设计时重叠区域30bpbp,但是一直没有做出来。
更换方案两片段融合后再将融合好的片段与第三个片段融合,电泳结果显示两片段融合后大小是正确的 ...
看看这个文件对你有没有帮助,我用这种办法把四个片段拼出来了
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5楼
2012-04-19 16:43:13
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proteinwang
铜虫
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自己顶一下,不要沉了!
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2楼
2010-10-16 08:41:30
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taigongzaici
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小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
感兴趣,随时关注,哪位高人指点一下,头一次听说
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3楼
2010-10-16 08:45:10
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hackett
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专业: 神经生物学
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我也是在做这个,是不是一开始拼模板的循环数要多一点。毕竟3个基因拼到一起的概率好像不大啊。我还在摸条件。拼模板的温度地点比较好。
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Dreamer
4楼
2012-04-14 23:12:18
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