应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】大肠杆菌，农杆菌质粒
121/2返回列表12下一页
查看: 2073  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

muyuan

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】大肠杆菌，农杆菌质粒 已有9人参与

虫友们转化大肠杆菌和农杆菌后，扩增目的片段好扩吗？会不会转进去了又扩不出来呀？
我转化的大肠杆菌和农杆菌在加相应抗生素的培养基里长得很正常，应该是转进去了才会长出来单菌落，可是怎么都扩不出来目的片段，到底是怎么回事呢，头疼死了！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-09-28 20:02:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

墨香若水

木虫 (著名写手)

小小囧虫
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
reasonspare(金币+2):谢谢分享。 2010-09-29 07:24:04
大肠杆菌一般不会出这种情况吧。假阳性可能是污染吧，楼主可由做对照：
赞一下(2人) 回复此楼
仕不可不弘毅，任重而道远
2楼2010-09-28 20:20:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

axskywings

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我的也是转化大肠杆菌以后还没有扩出来
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2010-09-28 21:45:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

怎么都行

银虫 (小有名气)
★
reasonspare(金币+1):谢谢分享。 2010-09-29 07:24:13
一则有可能是杂菌污染，因为实验室经常做类似实验，所以会有许多带有相关抗性的菌体扩散出来。
二则，确定目的片段已经连接到载体上了么？
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2010-09-28 23:46:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhixuec

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
对，要确定目的片段是否已经连接到载体上？
赞一下(1人) 回复此楼
酷爱の族
5楼2010-09-28 23:59:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cjk9

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
路过
回复此楼
6楼2010-09-29 00:05:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

muyuan

铁杆木虫 (著名写手)
目的片段确定转到载体上了
赞一下 回复此楼
7楼2010-09-29 08:45:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xufang7763

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
用质粒转化到农杆菌里，老是菌落可以扩出来，摇起来的菌液扩不出，是个怎么回事啊？
赞一下 回复此楼
人生就像赌博，有输有赢！
8楼2012-12-17 11:04:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
2415696楼: Originally posted by xufang7763 at 2012-12-17 11:04:40
用质粒转化到农杆菌里，老是菌落可以扩出来，摇起来的菌液扩不出，是个怎么回事啊？

取一点点的农杆菌液，离心，然后加上水，先100煮10分钟，然后再作为模板扩增，这样会好些，我以前做过农杆菌菌液PCR验证，都做出来过
赞一下 回复此楼
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
9楼2012-12-17 11:15:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xufang7763

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
2415699楼: Originally posted by gyesang at 2012-12-17 11:15:58
取一点点的农杆菌液，离心，然后加上水，先100煮10分钟，然后再作为模板扩增，这样会好些，我以前做过农杆菌菌液PCR验证，都做出来过...

这样做和直接用菌液作为模板有什么区别吗？第一次听说用这样的方法，请问取多少菌液离心，还有事100度吗，是要变性吗？
赞一下 回复此楼
人生就像赌博，有输有赢！
10楼2012-12-17 18:40:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 muyuan 的主题更新
121/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿西南交大，求调剂 +5 材化逐梦人 2026-03-18 5/250 2026-03-21 00:26 by JourneyLucky
[考研] 311求调剂 +5 冬十三 2026-03-18 5/250 2026-03-21 00:16 by JourneyLucky
[考研] 材料专硕英一数二306 +7 z1z2z3879 2026-03-18 7/350 2026-03-20 23:48 by JourneyLucky
[考研] 295求调剂 +4 一志愿京区211 2026-03-18 6/300 2026-03-20 23:41 by JourneyLucky
[考研] 一志愿南昌大学，327分，材料与化工085600 +9 Ncdx123456 2026-03-19 9/450 2026-03-20 23:41 by lovewei0727
[考研] 一志愿中海洋材料工程专硕330分求调剂 +8 小材化本科 2026-03-18 8/400 2026-03-20 23:16 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工 322求调剂 +4 然11 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:12 by luoyongfeng
[考研] 一志愿北京化工大学0703化学318分，有科研经历，求调剂 +4 一瓶苯甲酸 2026-03-14 4/200 2026-03-20 20:36 by fen_rao
[考研] 279分求调剂 一志愿211 +10 chaojifeixia 2026-03-19 11/550 2026-03-20 20:32 by JourneyLucky
[考研] 一志愿中国海洋大学，生物学，301分，求调剂 +5 1孙悟空 2026-03-17 6/300 2026-03-19 23:46 by zcl123
[考研] 320求调剂0856 +3 不想起名字112 2026-03-19 3/150 2026-03-19 22:53 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿西安交通大学材料工程专业 282分求调剂 +5 枫桥ZL 2026-03-18 7/350 2026-03-19 14:52 by 功夫疯狂
[考研] 0703化学 305求调剂 +4 FY_yy 2026-03-14 4/200 2026-03-19 05:54 by anny19840123
[考研] 化学工程321分求调剂 +15 大米饭！ 2026-03-15 18/900 2026-03-18 14:52 by haxia
[考研] 311求调剂 +11 冬十三 2026-03-15 12/600 2026-03-18 14:36 by 星空星月
[考研] 一志愿苏州大学材料工程（085601）专硕有科研经历三项国奖两个实用型专利一项省级立项 +6 大火山小火山 2026-03-16 8/400 2026-03-17 15:05 by 无懈可击111
[考研] 304求调剂 +3 曼殊2266 2026-03-14 3/150 2026-03-16 16:39 by houyaoxu
[考研] 0703化学调剂 290分有科研经历，论文在投 +7 腻腻gk 2026-03-14 7/350 2026-03-16 10:12 by houyaoxu
[考研] 326求调剂 +3 mlpqaz03 2026-03-15 3/150 2026-03-16 07:33 by Iveryant
[考研] 复试调剂 +3 呼呼？~+123456 2026-03-14 3/150 2026-03-14 16:53 by WTUChen
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭