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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】大肠杆菌，农杆菌质粒
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muyuan

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】大肠杆菌，农杆菌质粒 已有9人参与

虫友们转化大肠杆菌和农杆菌后，扩增目的片段好扩吗？会不会转进去了又扩不出来呀？
我转化的大肠杆菌和农杆菌在加相应抗生素的培养基里长得很正常，应该是转进去了才会长出来单菌落，可是怎么都扩不出来目的片段，到底是怎么回事呢，头疼死了！
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1楼 2010-09-28 20:02:56
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xufang7763

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
用质粒转化到农杆菌里，老是菌落可以扩出来，摇起来的菌液扩不出，是个怎么回事啊？
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人生就像赌博，有输有赢！
8楼2012-12-17 11:04:40
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墨香若水

木虫 (著名写手)

小小囧虫
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
reasonspare(金币+2):谢谢分享。 2010-09-29 07:24:04
大肠杆菌一般不会出这种情况吧。假阳性可能是污染吧，楼主可由做对照：
赞一下(2人) 回复此楼
仕不可不弘毅，任重而道远
2楼2010-09-28 20:20:43
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axskywings

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我的也是转化大肠杆菌以后还没有扩出来
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2010-09-28 21:45:12
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怎么都行

银虫 (小有名气)
★
reasonspare(金币+1):谢谢分享。 2010-09-29 07:24:13
一则有可能是杂菌污染，因为实验室经常做类似实验，所以会有许多带有相关抗性的菌体扩散出来。
二则，确定目的片段已经连接到载体上了么？
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2010-09-28 23:46:44
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