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asdfghjkl-00

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】困惑 已有5人参与

我用的是PMD18-T载体,长度为2692bp,插入片段在500左右,但是跑胶出的条带在5000左右。。。。。请问这是怎么回事啊?很困惑啊。。。。。
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魑魅-魍魉

新虫 (正式写手)

是不是楼主东西里面有杂质啊?还是胶的问题,再检查检查
风中摇曳的颤枝,何处是归根?
2楼2010-09-27 16:23:06
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houjinglhy

荣誉版主 (文坛精英)

表达自由,人权之基。

优秀版主


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
测序不就知道了吗 有可能是maker被你看错了
从小就学习鲁迅,直到现在才体会到他当时是多么的绝望和无助,却仍要用尽最后一丝力气声嘶力竭的呐喊!
3楼2010-09-27 16:37:52
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asdfghjkl-00

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by 魑魅-魍魉 at 2010-09-27 16:23:06:
是不是楼主东西里面有杂质啊?还是胶的问题,再检查检查

我的DNA是割胶回收的,可能回割下一些胶,会不会有影响?胶应该是没有问题。。。
4楼2010-09-28 09:50:46
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asdfghjkl-00

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by houjinglhy at 2010-09-27 16:37:52:
测序不就知道了吗 有可能是maker被你看错了

marker跑的是线性DNA,如果我们连接成功,应该是环状的,环状和线性DNA的电泳结果会不会不一样啊?
5楼2010-09-28 09:52:43
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houjinglhy

荣誉版主 (文坛精英)

表达自由,人权之基。

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小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by asdfghjkl-00 at 2010-09-28 09:52:43:

marker跑的是线性DNA,如果我们连接成功,应该是环状的,环状和线性DNA的电泳结果会不会不一样啊?

会的 但双螺旋只会跑更快 不可能有5000吧 3000BP 跑出来小于2000都有可能
从小就学习鲁迅,直到现在才体会到他当时是多么的绝望和无助,却仍要用尽最后一丝力气声嘶力竭的呐喊!
6楼2010-09-28 10:27:05
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zhaohq1209

铁杆木虫 (著名写手)


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连接转化后的克隆,经PCR鉴定后摇菌提质粒,酶切后电泳鉴定。
我有一个梦想,我梦想有一天,我们的人民可以根据自己的意愿与消费能力,居住在自己愿意居住的地方。
7楼2010-09-28 10:30:55
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yuanbo934

至尊木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
提取的质粒直接跑电泳不能说明问题,单酶切后跑电泳,或双酶切鉴定。如果测序用的话,用M13菌落 能扩出来,一般可以不用双酶切鉴定。
8楼2010-09-28 14:16:39
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