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bettyshan木虫 (正式写手)
梦幻biobrick
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【求助/交流】酶切后无任何条带是什么原因？
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我质粒跑胶，大小大概正确，然后做酶切验证。用一种酶切，可以产生两个片段。 我用NdeI酶切，4.5小时。酶切完后，跑胶，无任何条带。请大家帮我分析一下是什么原因？MARKER条带正常。 谢谢 |
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2楼2010-09-25 20:00:42
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lstt09nk(金币+3):很全面~~呵呵~~ 2010-09-25 22:36:34
bettyshan(金币+1):谢谢交流 2010-10-08 14:54:02
lstt09nk(金币+3):很全面~~呵呵~~ 2010-09-25 22:36:34
bettyshan(金币+1):谢谢交流 2010-10-08 14:54:02
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首先，我想说在我们实验室里，质粒跑电泳从来不用点Marker,只看看有没有条带（一般是1-3条带）即可，然后用提取的质粒为模板做PCR鉴定目的基因。如果PCR鉴定正确可以再做酶切鉴定， 其次，关于酶切没有条带。不知到你是要做单酶切还是双酶切。我猜你可能是要做单酶切实验。酶切没有目的基因原因很多，比如你提取的质粒上是否连有目的基因；提取的质粒中是否有酶抑制剂；酶切试剂在使用时是否存在不当；酶切时间是否恰当（在本实验室，4摄氏度，1-2d;16摄氏度，20h左右；37摄氏度，3h（这个用的较少）左右）等。 最后提一个建议，你在陈述问题的时候尽量详细，把问题说清楚，以便于让人明白你做实验过程中遇到的问题，便于解答你的问题。 以上仅是个人观点，仅作参考！！！！！！！！！！ |
4楼2010-09-25 22:09:33
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