| 查看: 1642 | 回复: 15 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
【求助/交流】离子交换纯化原核表达蛋白 已有6人参与
|
|||
| 目的蛋白的等电点是6.0左右，目的蛋白无纯化标签，我选择GE的CM-Sepharose F.F.进行纯化，pH5.1醋酸缓冲液平衡柱子和上样，然后用pH5.1醋酸缓冲液（内含0-0.5mol/L的NaCl）进行梯度洗脱，通过测定蛋白浓度，跑SDS-PAGE发现我的蛋白回收率特别低，然后我一直不知道我的蛋白跑哪里去了，后来我过完柱子后取一点柱子里的填料来煮样跑SDS-PAGE，发现原来还有很多蛋白(包括目的蛋白和杂蛋白）挂在柱子上，没有下来。我就加大了NaCl的浓度来洗脱，蛋白还是有很多下不来，请大家帮我分析下原因和提供点解决途径 谢谢。 |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有72人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 怎么分离分子伴侣和目的蛋白
已经有8人回复
- 求教离子交换柱纯化蛋白的问题
已经有28人回复
- 关于用Ni-NTA His.bind树脂纯化原核表达蛋白
已经有16人回复
- 用离子交换法纯化蛋白如何选定缓冲液？
已经有3人回复
- 分离纯化一种酶，需要知道关于这种酶的哪些信息？一般如何操作？
已经有6人回复
- 【求助】真核基因在原核生物表达
已经有4人回复
- 【求助/交流】蛋白质的阴离子交换纯化
已经有13人回复
- 【求助】 关于原核表达【有效日期截止：2011年2月28日】
已经有7人回复
- 【求助/交流】请教蛋白冻干的问题
已经有38人回复
- 【求助/交流】原核表达蛋白纯化
已经有29人回复
9楼2010-09-20 09:03:32
3楼2010-09-19 10:43:19
月月大可
木虫 (著名写手)
- MolEPI: 3
- 应助: 13 (小学生)
- 金币: 3272.1
- 散金: 1393
- 红花: 17
- 帖子: 1674
- 在线: 295.7小时
- 虫号: 549127
- 注册: 2008-04-20
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
4楼2010-09-19 11:23:03
5楼2010-09-19 14:22:07
