24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
查看: 1540  |  回复: 12
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

zhangrun0110

铁虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】克隆后DNA片段测序 急已有7人参与

我们做的是对PCR产物进行克隆,用的是宝生物的克隆试剂盒D101A,里面用的是pMD18-T载体,如果要拿去测序的话,需要向测序公司提供什么?还有一个弱弱的问题,我看不太懂他的克隆位点。。。

[ Last edited by zhangrun0110 on 2010-9-16 at 14:41 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

一笑35

铁虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
说对了,是得继续用加抗生素的LB培养基培养一下,如果长势良好即可拿到测序公司测序。
努力学习,充实自己!
4楼2010-09-16 15:06:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

wjswj

木虫 (正式写手)

小木虫领金币专业户


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
具体看载体说明书,一般用的测序引物都是T7,T7ter,也不用你提供。最好提供活菌或者纯化好的质粒。
金币是赌出来的
2楼2010-09-16 14:53:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangrun0110

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by wjswj at 2010-09-16 14:53:04:
具体看载体说明书,一般用的测序引物都是T7,T7ter,也不用你提供。最好提供活菌或者纯化好的质粒。

我们得到的是菌落,是不是还需要用液体LB培养基培养一下?培养基里是不是还得加抗生素?
3楼2010-09-16 15:04:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangrun0110

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by 一笑35 at 2010-09-16 15:06:29:
说对了,是得继续用加抗生素的LB培养基培养一下,如果长势良好即可拿到测序公司测序。

那我请问下长到什么程度就可以了呢?要用OD值确定吗?培养多长时间?
5楼2010-09-16 15:08:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复(可上传附件)
信息提示
请填处理意见